24小时热门版块排行榜    

查看: 4258  |  回复: 11
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

苍蝇小田七

铜虫 (初入文坛)

[求助] 探针法的荧光定量,ct值很小,而且还没有扩增曲线,求大神指导指导。 已有1人参与

最近在做探针法的荧光定量建立标准曲线,使用的DNA模板是自己构建的质粒,为阳性样品,在做这个之前已经做了两个了没有问题,现在这个去怎么也做不出扩增曲线了,一开始的时候都没有ct值,后来更改了反应条件后又ct值但是都比较小,而且依然没有扩增曲线。我自己也拿这个定量的引物做了普通的PCR(模板是相同的)电泳后也是没有条带。昨天我干脆拿提取的核酸做了模板做的PCR可是依然没有条带。真心求助啊。

探针法的荧光定量,ct值很小,而且还没有扩增曲线,求大神指导指导。
IMG_1522.JPG


探针法的荧光定量,ct值很小,而且还没有扩增曲线,求大神指导指导。-1
IMG_1523.JPG


探针法的荧光定量,ct值很小,而且还没有扩增曲线,求大神指导指导。-2
IMG_1524.JPG
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

许彦

木虫 (正式写手)

ct值是指扩增曲线和阈值线的交点,你这个图有ct的原因是阈值线调节错了,扩增应该是S形曲线,

发自小木虫Android客户端
8楼2016-05-07 09:49:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

XLK2011

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这种图不叫有Ct值!这种情况根本没有扩增,更谈不上Ct值了。
2楼2016-05-05 09:06:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

苍蝇小田七

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by XLK2011 at 2016-05-05 09:06:47
这种图不叫有Ct值!这种情况根本没有扩增,更谈不上Ct值了。

最后一张图上不是显示出来ct值了吗,那您知道这种情况是怎么回事吗?
3楼2016-05-05 09:19:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

XLK2011

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

这种情况根本没有扩增
4楼2016-05-05 09:37:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
信息提示
请填处理意见