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探针法的荧光定量，ct值很小，而且还没有扩增曲线，求大神指导指导。 已有1人参与
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最近在做探针法的荧光定量建立标准曲线，使用的DNA模板是自己构建的质粒，为阳性样品，在做这个之前已经做了两个了没有问题，现在这个去怎么也做不出扩增曲线了，一开始的时候都没有ct值，后来更改了反应条件后又ct值但是都比较小，而且依然没有扩增曲线。我自己也拿这个定量的引物做了普通的PCR（模板是相同的）电泳后也是没有条带。昨天我干脆拿提取的核酸做了模板做的PCR可是依然没有条带。真心求助啊。 IMG_1522.JPG  IMG_1523.JPG  IMG_1524.JPG |
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10楼2016-05-10 09:56:33
XLK2011
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2楼2016-05-05 09:06:47
3楼2016-05-05 09:19:31
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4楼2016-05-05 09:37:29
5楼2016-05-05 16:12:59
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你成功做出来过，说明这套体系（包括引物，探针，模板，程序）都没有问题。只这个做不出来，只能说明引物保存出了问题，或者配制反应液过程中忘记加某种成分也有可能。 发自小木虫Android客户端 |
6楼2016-05-05 19:57:12
7楼2016-05-07 09:11:16
8楼2016-05-07 09:49:17
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9楼2016-05-08 13:06:10