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苍蝇小田七

铜虫 (初入文坛)

[求助] 探针法的荧光定量，ct值很小，而且还没有扩增曲线，求大神指导指导。 已有1人参与

最近在做探针法的荧光定量建立标准曲线，使用的DNA模板是自己构建的质粒，为阳性样品，在做这个之前已经做了两个了没有问题，现在这个去怎么也做不出扩增曲线了，一开始的时候都没有ct值，后来更改了反应条件后又ct值但是都比较小，而且依然没有扩增曲线。我自己也拿这个定量的引物做了普通的PCR（模板是相同的）电泳后也是没有条带。昨天我干脆拿提取的核酸做了模板做的PCR可是依然没有条带。真心求助啊。

探针法的荧光定量，ct值很小，而且还没有扩增曲线，求大神指导指导。
IMG_1522.JPG


探针法的荧光定量，ct值很小，而且还没有扩增曲线，求大神指导指导。-1
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探针法的荧光定量，ct值很小，而且还没有扩增曲线，求大神指导指导。-2
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1楼 2016-05-05 08:57:04
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苍蝇小田七

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by XLK2011 at 2016-05-05 09:06:47
这种图不叫有Ct值！这种情况根本没有扩增，更谈不上Ct值了。

最后一张图上不是显示出来ct值了吗，那您知道这种情况是怎么回事吗？
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3楼2016-05-05 09:19:31
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XLK2011

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这种图不叫有Ct值！这种情况根本没有扩增，更谈不上Ct值了。
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2楼2016-05-05 09:06:47
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XLK2011

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

这种情况根本没有扩增
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4楼2016-05-05 09:37:29
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苍蝇小田七

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by XLK2011 at 2016-05-05 09:37:29
这种情况根本没有扩增

那您能告诉我一下是什么原因吗？我现在自己分析的是定量的引物有问题
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5楼2016-05-05 16:12:59
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