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xueyuxx

木虫 (小有名气)

[交流] 毕赤酵母表达

用KM71作表达菌株，9K作载体，经筛选，获得几个转化子，进行诱导表达，结果浓缩上清可以测到酶活，但是蛋白电泳没有条带，也就是说蛋白表达量太低。该怎么优化，提高表达量啊？？？？有木有成功的经验，可以借鉴一下
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1楼 2016-04-28 09:57:45
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假大空

木虫之王 (文学泰斗)
★
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顶顶顶
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7楼2016-04-28 11:16:35
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star013

新虫 (知名作家)
★
xueyuxx(金币+1): 谢谢参与
我们可以做蛋白表达优化

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30楼2016-04-28 13:35:44
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cp0713

新虫 (初入文坛)
我是小白，还不会

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33楼2016-05-04 22:14:32
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Joker_wang

金虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
做个丙酮沉淀试试 把蛋白沉淀下来再跑个sds 或者你用高浓度抗生素筛选高拷贝的重组子

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34楼2016-06-03 02:36:54
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libin6583802

新虫 (初入文坛)
浓缩一下吧
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36楼2016-07-04 09:30:16
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郭高杰

新虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
楼主，我一直在用毕赤酵母表达纤维降解辅助蛋白，也能纯化出目的蛋白，但是重复性有些差，
现在打算用粗酶活测酶学性质，发现酶活很低，同时对上清测了蛋白浓度，发现能有3 mg/ml的样子，不是说毕赤酵母杂带白比较少吗？还有，对空载的9k载体也做了蛋白浓度测定，跟转入目的基因的相似，求交流？
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37楼2019-04-21 22:09:30
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zhangzhiguang2楼
2016-04-28 10:01   回复  
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zhaoyan19783楼
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wtbccq5054楼
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jiechen5楼
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ieem6楼
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fly510008楼
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hbl2159楼
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hydzp10楼
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nono200911楼
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fw_xiao12楼
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tableman13楼
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psylhh14楼
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tzynew16楼
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三八洲19楼
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skyish22楼
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lvluohua23楼
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cdkzkfwrsr24楼
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小蜗牛_25楼
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李慧玲26楼
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bluesky200228楼
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llwff29楼
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gorgan31楼
2016-04-28 20:38   回复  
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梦想天行32楼
2016-04-28 23:44   回复  
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王娜99735楼
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