应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 流式细胞仪检测抗体染色细胞
51/1返回列表
查看: 1954  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

tbdlzf

新虫 (初入文坛)

[求助] 流式细胞仪检测抗体染色细胞 已有1人参与

本人在做AcMNPV病毒感染sf9昆虫细胞实验，加入病毒感染3-10个小时后取样，处理后上流式检测，收集的细胞数是20000个，分析细胞荧光强度分布情况。
细胞样是这样处理的：1200r/min离心5min后用PBS（加0.1%NaN3、3%BSA）清洗、加固定剂、清洗、再加抗体孵育，洗一遍后检测。处理方法都是按说明书来的，可是做了很多遍了，结果都和阴性对照结果没什么差别。求高手指点！（固定剂是life technologies的FIX&PERM，抗体是santa cruz的ACV1-FITC，可以特异结合病毒上的GP64蛋白，检测通道是FL1H）
图中紫色部分是实验组，绿色线条是阴性对照。文献里面两个波峰应该是可以错开的。

流式细胞仪检测抗体染色细胞
IMG_20160421_154037.jpg@gyesang
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2016-04-22 15:17:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tbdlzf

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by ghqiu09 at 2016-04-23 08:59:15
我觉得可能是你破膜的问题，你们实验室延续的都是这样的习惯吗？这种方法没问题？？？如果没问题，那问题会不会出现出现在感染效率的地方上...

破膜处理是按试剂说明书做的，而且非破膜组的结果也是这样的。本人是新手，请问您说的感染效率对结果可能造成什么样的影响？是说病毒还没有感染细胞吗？实验室的师兄以前做过检测，病毒完成吸附是很快的。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
5楼2016-04-23 09:44:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

ghqiu09

禁虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
tbdlzf: 金币+20, ★有帮助 2016-04-24 11:35:49
本帖内容被屏蔽
2楼2016-04-22 22:33:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tbdlzf

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ghqiu09 at 2016-04-22 22:33:49
那你的抗体结合的东西在胞内？那估计就要按染胞内的方法来吧？可是只看见固定，没见破膜啊，要不然你的抗体怎么进去细胞里面结合抗原。。。。

抗体是结合GP64蛋白的，也就是说理论上胞内和胞外都应该能结合抗体。破膜处理是有的，在固定洗涤后跟抗体一起加的破膜剂。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
3楼2016-04-22 22:53:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ghqiu09

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
4楼2016-04-23 08:59:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿山东大学药学学硕求调剂 +3 开开心心没烦恼 2026-03-23 4/200 2026-03-24 00:06 by 开开心心没烦恼
[考研] 07化学280分求调剂 +4 722865 2026-03-23 4/200 2026-03-24 00:01 by chixmc
[考研] 一志愿华东理工大学081700，初试分数271 +4 kotoko_ik 2026-03-23 5/250 2026-03-23 23:23 by 呆呆师姐
[考研] 081700 调剂 267分 +7 迷人的哈哈 2026-03-23 7/350 2026-03-23 23:19 by 星空星月
[考研] 335分 | 材料与化工专硕 | GPA 4.07 | 有科研经历 +4 cccchenso 2026-03-23 4/200 2026-03-23 23:00 by 徐ckkk
[考研] 一志愿211 初试270分 求调剂 +4 谷雨上岸 2026-03-23 5/250 2026-03-23 21:18 by 不惑可乐
[考研] 生物学一志愿985，分数349求调剂 +6 zxts12 2026-03-21 9/450 2026-03-23 18:37 by macy2011
[考研] 316求调剂 +7 梁茜雯 2026-03-19 7/350 2026-03-23 16:21 by lingjue
[考博] 招收博士1-2人 +3 QGZDSYS 2026-03-18 4/200 2026-03-22 10:25 by QGZDSYS
[考研] 286求调剂 +10 Faune 2026-03-21 10/500 2026-03-21 23:34 by 314126402
[考研] 资源与环境 调剂申请(333分) +5 holy J 2026-03-21 5/250 2026-03-21 22:42 by Catalysis25
[考研] 0805材料320求调剂 +3 深海物语 2026-03-20 3/150 2026-03-21 15:46 by 无际的草原
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境专硕，总分308求调剂 +3 墨墨漠 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:39 by JourneyLucky
[考研] 274求调剂 +10 S.H1 2026-03-18 10/500 2026-03-20 23:51 by JourneyLucky
[考研] 294求调剂材料与化工专硕 +15 陌の森林 2026-03-18 15/750 2026-03-20 23:28 by JourneyLucky
[考研] 材料与化工 322求调剂 +4 然11 2026-03-19 4/200 2026-03-20 22:12 by luoyongfeng
[考研] 一志愿吉林大学材料学硕321求调剂 +11 Ymlll 2026-03-18 15/750 2026-03-20 19:40 by 丁丁*
[考研] 一志愿中国海洋大学，生物学，301分，求调剂 +5 1孙悟空 2026-03-17 6/300 2026-03-19 23:46 by zcl123
[考研] 288求调剂，一志愿华南理工大学071005 +5 ioodiiij 2026-03-17 5/250 2026-03-19 18:22 by zcl123
[考研] 材料工程专硕调剂 +5 204818@lcx 2026-03-17 6/300 2026-03-18 22:55 by 204818@lcx
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭