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流式细胞仪检测抗体染色细胞 已有1人参与
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本人在做AcMNPV病毒感染sf9昆虫细胞实验，加入病毒感染3-10个小时后取样，处理后上流式检测，收集的细胞数是20000个，分析细胞荧光强度分布情况。 细胞样是这样处理的：1200r/min离心5min后用PBS（加0.1%NaN3、3%BSA）清洗、加固定剂、清洗、再加抗体孵育，洗一遍后检测。处理方法都是按说明书来的，可是做了很多遍了，结果都和阴性对照结果没什么差别。求高手指点！（固定剂是life technologies的FIX&PERM，抗体是santa cruz的ACV1-FITC，可以特异结合病毒上的GP64蛋白，检测通道是FL1H） 图中紫色部分是实验组，绿色线条是阴性对照。文献里面两个波峰应该是可以错开的。  IMG_20160421_154037.jpg@gyesang |
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3楼2016-04-22 22:53:03
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感谢参与，应助指数 +1
tbdlzf: 金币+20, ★有帮助 2016-04-24 11:35:49
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2楼2016-04-22 22:33:49
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4楼2016-04-23 08:59:15
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破膜处理是按试剂说明书做的，而且非破膜组的结果也是这样的。本人是新手，请问您说的感染效率对结果可能造成什么样的影响？是说病毒还没有感染细胞吗？实验室的师兄以前做过检测，病毒完成吸附是很快的。 发自小木虫Android客户端 |
5楼2016-04-23 09:44:37
