应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 流式细胞仪检测抗体染色细胞
51/1返回列表
查看: 2066  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

tbdlzf

新虫 (初入文坛)

[求助] 流式细胞仪检测抗体染色细胞 已有1人参与

本人在做AcMNPV病毒感染sf9昆虫细胞实验，加入病毒感染3-10个小时后取样，处理后上流式检测，收集的细胞数是20000个，分析细胞荧光强度分布情况。
细胞样是这样处理的：1200r/min离心5min后用PBS（加0.1%NaN3、3%BSA）清洗、加固定剂、清洗、再加抗体孵育，洗一遍后检测。处理方法都是按说明书来的，可是做了很多遍了，结果都和阴性对照结果没什么差别。求高手指点！（固定剂是life technologies的FIX&PERM，抗体是santa cruz的ACV1-FITC，可以特异结合病毒上的GP64蛋白，检测通道是FL1H）
图中紫色部分是实验组，绿色线条是阴性对照。文献里面两个波峰应该是可以错开的。

流式细胞仪检测抗体染色细胞
IMG_20160421_154037.jpg@gyesang
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2016-04-22 15:17:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ghqiu09

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
4楼2016-04-23 08:59:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

ghqiu09

禁虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
tbdlzf: 金币+20, ★有帮助 2016-04-24 11:35:49
本帖内容被屏蔽
2楼2016-04-22 22:33:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tbdlzf

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ghqiu09 at 2016-04-22 22:33:49
那你的抗体结合的东西在胞内？那估计就要按染胞内的方法来吧？可是只看见固定，没见破膜啊，要不然你的抗体怎么进去细胞里面结合抗原。。。。

抗体是结合GP64蛋白的，也就是说理论上胞内和胞外都应该能结合抗体。破膜处理是有的，在固定洗涤后跟抗体一起加的破膜剂。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
3楼2016-04-22 22:53:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tbdlzf

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by ghqiu09 at 2016-04-23 08:59:15
我觉得可能是你破膜的问题，你们实验室延续的都是这样的习惯吗？这种方法没问题？？？如果没问题，那问题会不会出现出现在感染效率的地方上...

破膜处理是按试剂说明书做的，而且非破膜组的结果也是这样的。本人是新手，请问您说的感染效率对结果可能造成什么样的影响？是说病毒还没有感染细胞吗？实验室的师兄以前做过检测，病毒完成吸附是很快的。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
5楼2016-04-23 09:44:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 关于代码变化问题，想知道的进来 +15 且听虎啸 2026-08-07 22/1100 2026-08-09 22:13 by 布布和一二
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +10 布布和一二 2026-08-08 21/1050 2026-08-09 17:21 by 天神眷顾
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] fileCode有新解读？ +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于filecode，很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 好奇怪的filecode +3 布布和一二 2026-08-08 4/200 2026-08-08 17:46 by zhanghaozhu
[基金申请] 基金中了 +14 laoda193707 2026-08-06 14/700 2026-08-08 00:23 by 实验小白ha
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 娱乐 +6 Tide man 2026-08-03 6/300 2026-08-07 22:40 by 铁帽子农民
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变，有变的大神么？ +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[基金申请] 大家散了吧，后缀研究没有意义，别浪费时间了，过好目前的每一天，不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[基金申请] 8月时间戳变的，举个手。玩一下，释放压力 +9 archvillain 2026-08-04 11/550 2026-08-05 20:06 by wlwhappy
[基金申请] 好消息？这个有何含义？？？ +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
[基金申请] 纯娱乐，不喜欢勿喷 +7 Tide man 2026-08-04 10/500 2026-08-04 15:10 by loufangrui
[基金申请] 什么时候能放榜呀？ +3 Jacob678 2026-08-03 3/150 2026-08-03 16:14 by gltch
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭