24小时热门版块排行榜    

查看: 1957  |  回复: 6
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

tbdlzf

新虫 (初入文坛)

[求助] 流式细胞仪检测抗体染色细胞 已有1人参与

本人在做AcMNPV病毒感染sf9昆虫细胞实验,加入病毒感染3-10个小时后取样,处理后上流式检测,收集的细胞数是20000个,分析细胞荧光强度分布情况。
细胞样是这样处理的:1200r/min离心5min后用PBS(加0.1%NaN3、3%BSA)清洗、加固定剂、清洗、再加抗体孵育,洗一遍后检测。处理方法都是按说明书来的,可是做了很多遍了,结果都和阴性对照结果没什么差别。求高手指点!(固定剂是life technologies的FIX&PERM,抗体是santa cruz的ACV1-FITC,可以特异结合病毒上的GP64蛋白,检测通道是FL1H)
图中紫色部分是实验组,绿色线条是阴性对照。文献里面两个波峰应该是可以错开的。

流式细胞仪检测抗体染色细胞
IMG_20160421_154037.jpg@gyesang
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ghqiu09

禁虫 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

4楼2016-04-23 08:59:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

ghqiu09

禁虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
tbdlzf: 金币+20, 有帮助 2016-04-24 11:35:49
本帖内容被屏蔽

2楼2016-04-22 22:33:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tbdlzf

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by ghqiu09 at 2016-04-22 22:33:49
那你的抗体结合的东西在胞内?那估计就要按染胞内的方法来吧?可是只看见固定,没见破膜啊,要不然你的抗体怎么进去细胞里面结合抗原。。。。

抗体是结合GP64蛋白的,也就是说理论上胞内和胞外都应该能结合抗体。破膜处理是有的,在固定洗涤后跟抗体一起加的破膜剂。

发自小木虫Android客户端
3楼2016-04-22 22:53:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tbdlzf

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by ghqiu09 at 2016-04-23 08:59:15
我觉得可能是你破膜的问题,你们实验室延续的都是这样的习惯吗?这种方法没问题???如果没问题,那问题会不会出现出现在感染效率的地方上...

破膜处理是按试剂说明书做的,而且非破膜组的结果也是这样的。本人是新手,请问您说的感染效率对结果可能造成什么样的影响?是说病毒还没有感染细胞吗?实验室的师兄以前做过检测,病毒完成吸附是很快的。

发自小木虫Android客户端
5楼2016-04-23 09:44:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 08工学调剂 +7 用户573181 2026-03-20 12/600 2026-03-24 11:17 by 用户573181
[考研] 一志愿南航材料专317分求调剂 +4 炸呀炸呀炸薯条 2026-03-23 4/200 2026-03-24 07:32 by wangy0907
[考研] 环境学硕288求调剂 +8 皮皮皮123456 2026-03-22 8/400 2026-03-23 23:47 by 热情沙漠
[考研] 一志愿北京化工大学 070300 学硕 336分 求调剂 +7 vv迷 2026-03-22 7/350 2026-03-23 23:44 by Txy@872106
[考研] 284求调剂 +3 yanzhixue111 2026-03-23 6/300 2026-03-23 22:58 by pswait
[考研] 070300化学求调剂 +8 苑豆豆 2026-03-20 8/400 2026-03-23 20:57 by baobaoye
[考研] 0703化学求调剂 +4 奶油草莓. 2026-03-22 5/250 2026-03-23 19:37 by pswait
[考研] 一志愿西安交通大学材料工程专业 282分求调剂 +11 枫桥ZL 2026-03-18 13/650 2026-03-22 20:26 by edmund7
[考研] 303求调剂 +5 安忆灵 2026-03-22 6/300 2026-03-22 12:46 by 素颜倾城1988
[考研] 285求调剂 +6 ytter 2026-03-22 6/300 2026-03-22 12:09 by 星空星月
[考研] 085600材料与化工306 +4 z1z2z3879 2026-03-21 4/200 2026-03-21 23:44 by ms629
[基金申请] 学校已经提交到NSFC,还能修改吗? 40+4 babangida 2026-03-19 9/450 2026-03-21 16:12 by babangida
[考研] 083200学硕321分一志愿暨南大学求调剂 +3 innocenceF 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:35 by JourneyLucky
[考研] 一志愿华南师大 070300(化学)304分求调剂 +3 0703武芊慧雪304 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:48 by JourneyLucky
[考研] 304求调剂 +6 曼殊2266 2026-03-18 6/300 2026-03-21 00:32 by JourneyLucky
[考研] 295求调剂 +4 一志愿京区211 2026-03-18 6/300 2026-03-20 23:41 by JourneyLucky
[考研] 一志愿武汉理工材料工程专硕调剂 +9 Doleres 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:36 by JourneyLucky
[考研] 329求调剂 +9 想上学吖吖 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:01 by luoyongfeng
[考研] 招收调剂硕士 +4 lidianxing 2026-03-19 12/600 2026-03-20 12:25 by lidianxing
[考研] 生物学调剂招人!!! +3 山海天岚 2026-03-17 4/200 2026-03-19 21:34 by 怎么释怀
信息提示
请填处理意见