应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 流式细胞仪检测抗体染色细胞
71/1返回列表
查看: 1955  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

tbdlzf

新虫 (初入文坛)

[求助] 流式细胞仪检测抗体染色细胞 已有1人参与

本人在做AcMNPV病毒感染sf9昆虫细胞实验，加入病毒感染3-10个小时后取样，处理后上流式检测，收集的细胞数是20000个，分析细胞荧光强度分布情况。
细胞样是这样处理的：1200r/min离心5min后用PBS（加0.1%NaN3、3%BSA）清洗、加固定剂、清洗、再加抗体孵育，洗一遍后检测。处理方法都是按说明书来的，可是做了很多遍了，结果都和阴性对照结果没什么差别。求高手指点！（固定剂是life technologies的FIX&PERM，抗体是santa cruz的ACV1-FITC，可以特异结合病毒上的GP64蛋白，检测通道是FL1H）
图中紫色部分是实验组，绿色线条是阴性对照。文献里面两个波峰应该是可以错开的。

流式细胞仪检测抗体染色细胞
IMG_20160421_154037.jpg@gyesang
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2016-04-22 15:17:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ghqiu09

禁虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
tbdlzf: 金币+20, ★有帮助 2016-04-24 11:35:49
本帖内容被屏蔽
2楼2016-04-22 22:33:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tbdlzf

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ghqiu09 at 2016-04-22 22:33:49
那你的抗体结合的东西在胞内？那估计就要按染胞内的方法来吧？可是只看见固定，没见破膜啊，要不然你的抗体怎么进去细胞里面结合抗原。。。。

抗体是结合GP64蛋白的，也就是说理论上胞内和胞外都应该能结合抗体。破膜处理是有的，在固定洗涤后跟抗体一起加的破膜剂。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
3楼2016-04-22 22:53:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ghqiu09

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
4楼2016-04-23 08:59:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tbdlzf

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by ghqiu09 at 2016-04-23 08:59:15
我觉得可能是你破膜的问题，你们实验室延续的都是这样的习惯吗？这种方法没问题？？？如果没问题，那问题会不会出现出现在感染效率的地方上...

破膜处理是按试剂说明书做的，而且非破膜组的结果也是这样的。本人是新手，请问您说的感染效率对结果可能造成什么样的影响？是说病毒还没有感染细胞吗？实验室的师兄以前做过检测，病毒完成吸附是很快的。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
5楼2016-04-23 09:44:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

柚子小姐lu

铜虫 (正式写手)
请问一下 你用流式细胞仪跑出来的图 用什么软件处理的？ 我跑的也是这样的曲线图，怎么样才能处理成可以放到文章里面的那种？是什么软件可以处理？谢谢 交流
赞一下 回复此楼
6楼2016-10-06 21:18:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tbdlzf

新虫 (初入文坛)
我放上去的是用自带的分析软件CELL QUEST Pro分析的，放论文上最好是用Flowjo软件做，这个软件正版的要购买，不过好像也有破解版的。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
7楼2016-10-07 09:01:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 tbdlzf 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 341求调剂(一志愿湖南大学070300) +5 番茄头--- 2026-03-22 6/300 2026-03-23 23:45 by Txy@872106
[考研] 291求调剂 +8 hhhhxn.. 2026-03-23 8/400 2026-03-23 23:15 by peike
[考研] 生物学学硕求调剂 +4 小羊睡着了? 2026-03-23 4/200 2026-03-23 21:42 by hyzs6688
[考研] 材料专硕英一数二306 +8 z1z2z3879 2026-03-18 8/400 2026-03-23 20:49 by baobaoye
[考研] 336求调剂 +4 收到VS 2026-03-20 4/200 2026-03-23 19:02 by macy2011
[考研] 316求调剂 +7 梁茜雯 2026-03-19 7/350 2026-03-23 16:21 by lingjue
[考研] 08工学调剂 +7 用户573181 2026-03-20 11/550 2026-03-23 15:47 by 我爱学习学习使�
[考研] 352求调剂 +3 大米饭！ 2026-03-22 3/150 2026-03-22 23:28 by king123！
[考研] 石河子大学（211、双一流）硕博研究生长期招生公告 +3 李子目 2026-03-22 3/150 2026-03-22 21:01 by 怎么释怀
[考研] 一志愿西安交通大学材料工程专业 282分求调剂 +11 枫桥ZL 2026-03-18 13/650 2026-03-22 20:26 by edmund7
[考研] 308求调剂 +3 墨墨漠 2026-03-21 3/150 2026-03-22 16:54 by i_cooler
[考研] 初试 317 +7 半拉月丙 2026-03-20 7/350 2026-03-21 22:26 by peike
[考研] 材料与化工（0856）304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-20 7/350 2026-03-21 19:05 by 15709483992
[考研] 0703化学297求调剂 +3 Daisy☆ 2026-03-20 3/150 2026-03-21 17:45 by ColorlessPI
[考研] 311求调剂 +3 勇敢的小吴 2026-03-20 3/150 2026-03-21 17:40 by ColorlessPI
[考研] 一志愿天津大学化学工艺专业（081702）315分求调剂 +12 yangfz 2026-03-17 12/600 2026-03-21 03:30 by JourneyLucky
[考研] 材料工程（专）一志愿985 初试335求调剂 +3 hiloiy 2026-03-17 4/200 2026-03-21 03:04 by JourneyLucky
[考研] 294求调剂材料与化工专硕 +15 陌の森林 2026-03-18 15/750 2026-03-20 23:28 by JourneyLucky
[考研] 考研调剂求学校推荐 +3 伯乐29 2026-03-18 5/250 2026-03-20 22:59 by JourneyLucky
[考研] 材料学求调剂 +4 Stella_Yao 2026-03-20 4/200 2026-03-20 20:28 by ms629
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭