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19911025zy

银虫 (初入文坛)

[求助] 大肠杆菌高密度发酵求教 已有3人参与

一般大肠杆菌高密度上罐后的发酵周期是多久啊?我得每隔一两个小时测残糖,是不是还得熬通宵啊?求大神指导
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jiuzi59

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by zywys2009 at 2016-05-13 15:30:59
发酵一般都是一个小团队的活,大肠杆菌已经是发酵时间很短的菌种了...

一个人要做分子改造,还要做发酵,哪能发酵熬夜呢?不过发酵还做的可以。以前还测下残糖,现在根本都不用仪器测了,其实很简单,缺糖的时候DO、pH回升,这时候需要补糖。大肠杆菌一般耗糖补糖最高在1%/h(w/w),从补糖开始就线性增加到1%/h,后期一直是这个的补糖速率,OD可以轻松达到100的。这是我的经验,现在我只在补糖的时候看看,后面就不管了。你可以试试看,做到这样,其实发酵不累的。
9楼2016-05-23 21:07:09
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zywys2009

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

20多个小时吧,也见过30+的,通宵很正常啊!
2楼2016-05-09 16:53:51
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123hzgd

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

多大的罐,100L的12h就够啦,熬夜必须的
3楼2016-05-11 13:34:10
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Xsonglin

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

看什么产品了,做过最长的60h,4小时测一次残糖。
4楼2016-05-11 14:10:11
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a2703521

金虫 (小有名气)

123

看你培养的温度和最终的菌体浓度,我们以前低温培养60h,干重80g/L,基本是两个人轮流值班
5楼2016-05-12 16:09:40
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19911025zy

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zywys2009 at 2016-05-09 16:53:51
20多个小时吧,也见过30+的,通宵很正常啊!

一个人做实验熬通宵好累啊
6楼2016-05-12 23:13:40
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19911025zy

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 123hzgd at 2016-05-11 13:34:10
多大的罐,100L的12h就够啦,熬夜必须的

我们是6L的小罐,一个人熬通宵,连续工作20个小时实在是扛不住啊
7楼2016-05-12 23:14:53
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zywys2009

木虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 19911025zy at 2016-05-12 23:13:40
一个人做实验熬通宵好累啊...

发酵一般都是一个小团队的活,大肠杆菌已经是发酵时间很短的菌种了
8楼2016-05-13 15:30:59
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zywys2009

木虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by jiuzi59 at 2016-05-23 21:07:09
一个人要做分子改造,还要做发酵,哪能发酵熬夜呢?不过发酵还做的可以。以前还测下残糖,现在根本都不用仪器测了,其实很简单,缺糖的时候DO、pH回升,这时候需要补糖。大肠杆菌一般耗糖补糖最高在1%/h(w/w),从补 ...

看来你的发酵工艺很成熟了,挺羡慕的。
我们主要做可溶性和胞外表达,有的品种还涉及到抗生素禁止使用的情况,所以操作时需要根据实际情况调整补料速度,不单单是补糖。小罐(5-50L)做好了工艺,上大罐又是各种问题,目前大罐还未有稳定的工艺,还是挺累的。
10楼2016-05-24 09:45:37
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