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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 大肠杆菌高密度发酵求教
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19911025zy

银虫 (初入文坛)

[求助] 大肠杆菌高密度发酵求教 已有3人参与

一般大肠杆菌高密度上罐后的发酵周期是多久啊？我得每隔一两个小时测残糖，是不是还得熬通宵啊？求大神指导
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高密度发酵

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1楼 2016-04-21 11:27:42
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

jiuzi59

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by zywys2009 at 2016-05-13 15:30:59
发酵一般都是一个小团队的活，大肠杆菌已经是发酵时间很短的菌种了...

一个人要做分子改造，还要做发酵，哪能发酵熬夜呢？不过发酵还做的可以。以前还测下残糖，现在根本都不用仪器测了，其实很简单，缺糖的时候DO、pH回升，这时候需要补糖。大肠杆菌一般耗糖补糖最高在1%/h（w/w),从补糖开始就线性增加到1%/h，后期一直是这个的补糖速率，OD可以轻松达到100的。这是我的经验，现在我只在补糖的时候看看，后面就不管了。你可以试试看，做到这样，其实发酵不累的。
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9楼2016-05-23 21:07:09
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普通回帖

zywys2009

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

20多个小时吧，也见过30+的，通宵很正常啊！
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2楼2016-05-09 16:53:51
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123hzgd

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

多大的罐，100L的12h就够啦，熬夜必须的
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3楼2016-05-11 13:34:10
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Xsonglin

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

看什么产品了，做过最长的60h，4小时测一次残糖。
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4楼2016-05-11 14:10:11
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a2703521

金虫 (小有名气)

123
看你培养的温度和最终的菌体浓度，我们以前低温培养60h，干重80g/L，基本是两个人轮流值班
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5楼2016-05-12 16:09:40
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19911025zy

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zywys2009 at 2016-05-09 16:53:51
20多个小时吧，也见过30+的，通宵很正常啊！

一个人做实验熬通宵好累啊
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6楼2016-05-12 23:13:40
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19911025zy

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 123hzgd at 2016-05-11 13:34:10
多大的罐，100L的12h就够啦，熬夜必须的

我们是6L的小罐，一个人熬通宵，连续工作20个小时实在是扛不住啊
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7楼2016-05-12 23:14:53
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zywys2009

木虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 19911025zy at 2016-05-12 23:13:40
一个人做实验熬通宵好累啊...

发酵一般都是一个小团队的活，大肠杆菌已经是发酵时间很短的菌种了
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8楼2016-05-13 15:30:59
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zywys2009

木虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by jiuzi59 at 2016-05-23 21:07:09
一个人要做分子改造，还要做发酵，哪能发酵熬夜呢？不过发酵还做的可以。以前还测下残糖，现在根本都不用仪器测了，其实很简单，缺糖的时候DO、pH回升，这时候需要补糖。大肠杆菌一般耗糖补糖最高在1%/h（w/w),从补 ...

看来你的发酵工艺很成熟了，挺羡慕的。
我们主要做可溶性和胞外表达，有的品种还涉及到抗生素禁止使用的情况，所以操作时需要根据实际情况调整补料速度，不单单是补糖。小罐（5-50L）做好了工艺，上大罐又是各种问题，目前大罐还未有稳定的工艺，还是挺累的。
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10楼2016-05-24 09:45:37
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