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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » SSR PAGE胶的问题
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杨苗苗

新虫 (正式写手)

[求助] SSR PAGE胶的问题 已有1人参与

如图，maker跑不好，条带下面的重影是怎么回事呀。筛引物的时候没有。200v的电压跑的，跑了2个小时30分钟。8%的非变形聚丙烯酰胺。板的垂直距离为13cm，长度较长，可点100个样。请高手指点。
SSR PAGE胶的问题
SSR.png
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1楼 2016-04-20 21:32:23
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simao1919

木虫 (正式写手)
减少上样量，一般2微升，染胶时间稍微长了点？

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2楼2016-04-21 00:01:36
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杨苗苗

新虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by simao1919 at 2016-04-21 00:01:36
减少上样量，一般2微升，染胶时间稍微长了点？

谢谢，我试试

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3楼2016-04-21 16:46:47
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zfy535251

新虫 (小有名气)
您好，我想问一下，我现在确定了一个区间，大概有400000bp，我想用SSR做一个这段区间的遗传图谱，再缩小一下这个距离，您看可行吗

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4楼2016-04-30 16:32:49
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mexy2008

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

你的是大板子，我跑小板子，虽然不一样，但是我说下我的：你可以适当把电压调低一点，多跑一会儿。还有就是上样量的问题，银染的辨别率很高，稍微一点样就是可以的。Marker也是一样，少上一点，完全可以显色出来的。上图Marker大片段都几乎分别不出来了，就是上样过多造成的。条带向下弯曲，应该是电压问题吧。你可以试试看，祝好运！
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5楼2016-05-30 15:24:05
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