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[求助]
用T4酶做载体自连接，不长克隆，求大家给支招 已有1人参与
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| 最近在做质粒构建，目的载体11000bp,目的片段1000bp.之前一直在用TAKARA的in-fusion重组酶连接，无论怎么连都不长菌，后来打算用T4连接，我先把单酶切的载体加T4连接酶做了自连接，看是否长菌，结果这都不长菌，载体自连接体系10ul,载体200ng左右。抗性和感受态都没有问题，做了阳性对照。为什么载体自连接都不长菌，这是不是很诡异，想破了脑袋，也分析不出原因，求各位有经验的虫友们分析原因 |
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