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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 农杆菌感受态制备
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喻德鹏

新虫 (初入文坛)

[求助] 农杆菌感受态制备 已有1人参与

我用的是0.1m/l的氯化钙，失败三次了，我看网上好多人都用含15%甘油的氯化钙，是不是用不含甘油的氯化钙就做不出来？

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1楼 2016-04-01 10:18:30
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卡维斯

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
喻德鹏: 金币+20, ★★★很有帮助 2016-04-01 18:35:53
最后加甘油的氯化钙是为了保护感受态细胞的不被冻死，应该加的。
感受态制备成功应该器皿要非常干净，摇到合适OD值，冰上操作。
加油
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2楼2016-04-01 17:48:23
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喻德鹏

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 卡维斯 at 2016-04-01 17:48:23
最后加甘油的氯化钙是为了保护感受态细胞的不被冻死，应该加的。
感受态制备成功应该器皿要非常干净，摇到合适OD值，冰上操作。
加油

谢谢

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3楼2016-04-01 18:35:16
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Davan2464

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 卡维斯 at 2016-04-01 17:48:23
最后加甘油的氯化钙是为了保护感受态细胞的不被冻死，应该加的。
感受态制备成功应该器皿要非常干净，摇到合适OD值，冰上操作。
加油

在超净台也要冰上操作吗？

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4楼2016-04-18 16:18:11
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卡维斯

金虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by Davan2464 at 2016-04-18 16:18:11
在超净台也要冰上操作吗？
...

从你离心收集菌体开始都得低温操作，4度离心，冰上操作。
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5楼2016-04-18 17:50:41
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