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喻德鹏

新虫 (初入文坛)

[求助] 农杆菌感受态制备 已有1人参与

我用的是0.1m/l的氯化钙,失败三次了,我看网上好多人都用含15%甘油的氯化钙,是不是用不含甘油的氯化钙就做不出来?

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卡维斯

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
喻德鹏: 金币+20, ★★★很有帮助 2016-04-01 18:35:53
最后加甘油的氯化钙是为了保护感受态细胞的不被冻死,应该加的。
感受态制备成功应该器皿要非常干净,摇到合适OD值,冰上操作。
加油
2楼2016-04-01 17:48:23
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喻德鹏

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 卡维斯 at 2016-04-01 17:48:23
最后加甘油的氯化钙是为了保护感受态细胞的不被冻死,应该加的。
感受态制备成功应该器皿要非常干净,摇到合适OD值,冰上操作。
加油

谢谢

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3楼2016-04-01 18:35:16
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Davan2464

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 卡维斯 at 2016-04-01 17:48:23
最后加甘油的氯化钙是为了保护感受态细胞的不被冻死,应该加的。
感受态制备成功应该器皿要非常干净,摇到合适OD值,冰上操作。
加油

在超净台也要冰上操作吗?

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4楼2016-04-18 16:18:11
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卡维斯

金虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by Davan2464 at 2016-04-18 16:18:11
在超净台也要冰上操作吗?
...

从你离心收集菌体开始都得低温操作,4度离心,冰上操作。
5楼2016-04-18 17:50:41
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