应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 分子生理 » 双荧光素酶报告基因问题 LUC REN
51/1返回列表
查看: 14286  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

玉兔Jane

新虫 (小有名气)

[求助] 双荧光素酶报告基因问题 LUC REN 已有1人参与

1个转录因子，1个启动子，想要研究转录因子对启动子的调控。
实验设计：
1、构建转录因子过表达载体，TF
2、构建启动子+LUC载体，p
3、单独的一个载体，REN海肾荧光素酶载体作为内参，ren
4、35sTF+p+ren     35s空载+p+ren    3个载体共转化拟南芥原生质体，使用Promega试剂盒，单管测LUC，REN荧光，不是用的酶标仪。
结果：不同样品之间，海肾荧光素酶REN的值差别挺大，最小的500，最大的10000。空白对照（原生质体没有加质粒，后面步骤一样的），100左右，所以转化是成功了吧。
问题：理论上来说，不同样品之间的REN值应该差不多的啊，感觉操作也没啥问题，差异这么大，可能的原因有哪些？
谢谢啦～
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2016-03-26 15:06:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

央宗兰泽

新虫 (初入文坛)
老师你好，我也在做这方面的实验，我想问一下，这个荧光素酶报告基因的是用什么仪器检测的，可以用酶标仪吗？还是荧光显微镜，如果是荧光显微镜的话，是普通的就可以还是的用倒置的？

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
8楼2017-02-27 22:07:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

小崔姐姐03

新虫 (初入文坛)
感觉500的是不对的，因为不加质粒的空白对照的值，通常比其它的值小一百倍，才是正确的

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
2楼2016-03-26 15:15:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

玉兔Jane

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 小崔姐姐03 at 2016-03-26 15:15:59
感觉500的是不对的，因为不加质粒的空白对照的值，通常比其它的值小一百倍，才是正确的

谢谢！你的实验结果ren值不同样品差异大吗？一百倍的话，按照我的空白100计算的话，所有的结果都是不对的了
因为海肾荧光素酶是作为对照，质粒加的少一些，所以这个值没有很高。
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2016-03-26 15:38:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

拍个黄瓜

新虫 (初入文坛)
质粒间产生cross talk导致，可换成pGl4 Renilla-TK的载体，并对转录因子质粒，Firefly和Renilla质粒做优化

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
5楼2016-06-14 22:16:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 4/200 2026-09-15 07:50 by C79jjtjAKjEn
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 3/150 2026-09-15 07:46 by C79jjtjAKjEn
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +5 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 6/300 2026-09-15 07:38 by C79jjtjAKjEn
[考博] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +6 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 6/300 2026-09-15 07:14 by C79jjtjAKjEn
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 4/200 2026-09-15 07:02 by 5BDX0d0WFp7t
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 5/250 2026-09-15 06:49 by 5BDX0d0WFp7t
[公派出国] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 5/250 2026-09-15 06:38 by 5BDX0d0WFp7t
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 3/150 2026-09-15 05:49 by 5BDX0d0WFp7t
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 6/300 2026-09-15 05:38 by 5BDX0d0WFp7t
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 5/250 2026-09-15 05:34 by 5BDX0d0WFp7t
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +6 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 7/350 2026-09-15 05:22 by 5BDX0d0WFp7t
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +6 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 8/400 2026-09-15 05:01 by mibUvS8DDCwf
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 23jxep3nCNZb 2026-09-14 3/150 2026-09-15 01:21 by mibUvS8DDCwf
[博后之家] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 4/200 2026-09-14 23:24 by vZfe6xYu34yj
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 4/200 2026-09-14 21:37 by vZfe6xYu34yj
[考博] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 5/250 2026-09-14 21:36 by vZfe6xYu34yj
[考博] 上海工程技术大学激光智能制造课题组招收博士研究生 +4 两三岁ss 2026-09-14 4/200 2026-09-14 20:29 by 班主任的同桌
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 4/200 2026-09-14 17:48 by Aj1rhIDL5ixY
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 4/200 2026-09-14 16:13 by Aj1rhIDL5ixY
[教师之家] 浙江师范大学是怎么坑我的 +10 recruit123 2026-09-09 15/750 2026-09-13 10:45 by seaskyy
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭