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玉兔Jane

新虫 (小有名气)

[求助] 双荧光素酶报告基因问题 LUC REN 已有1人参与

1个转录因子,1个启动子,想要研究转录因子对启动子的调控。
实验设计:
1、构建转录因子过表达载体,TF
2、构建启动子+LUC载体,p
3、单独的一个载体,REN海肾荧光素酶载体作为内参,ren
4、35sTF+p+ren     35s空载+p+ren    3个载体共转化拟南芥原生质体,使用Promega试剂盒,单管测LUC,REN荧光,不是用的酶标仪。
结果:不同样品之间,海肾荧光素酶REN的值差别挺大,最小的500,最大的10000。空白对照(原生质体没有加质粒,后面步骤一样的),100左右,所以转化是成功了吧。
问题:理论上来说,不同样品之间的REN值应该差不多的啊,感觉操作也没啥问题,差异这么大,可能的原因有哪些?
谢谢啦~
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央宗兰泽

新虫 (初入文坛)

老师你好,我也在做这方面的实验,我想问一下,这个荧光素酶报告基因的是用什么仪器检测的,可以用酶标仪吗?还是荧光显微镜,如果是荧光显微镜的话,是普通的就可以还是的用倒置的?

发自小木虫Android客户端
8楼2017-02-27 22:07:05
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