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双荧光素酶报告基因问题 LUC REN 已有1人参与
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1个转录因子，1个启动子，想要研究转录因子对启动子的调控。 实验设计： 1、构建转录因子过表达载体，TF 2、构建启动子+LUC载体，p 3、单独的一个载体，REN海肾荧光素酶载体作为内参，ren 4、35sTF+p+ren 35s空载+p+ren 3个载体共转化拟南芥原生质体，使用Promega试剂盒，单管测LUC，REN荧光，不是用的酶标仪。 结果：不同样品之间，海肾荧光素酶REN的值差别挺大，最小的500，最大的10000。空白对照（原生质体没有加质粒，后面步骤一样的），100左右，所以转化是成功了吧。 问题：理论上来说，不同样品之间的REN值应该差不多的啊，感觉操作也没啥问题，差异这么大，可能的原因有哪些？ 谢谢啦～ |
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