| 查看: 1669 | 回复: 12 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
重组时质粒与目的片段连不上！求帮解答~ 已有2人参与
|
||
| 我最近用SphI和KpnI双酶切质粒5400bp和目的片段1431bp，用T4连接酶进行连接，之后转化，板长得很正常，但是菌液PCR时不能P出目的条带，已经重复好几次连接转化了还是不能P出目的条带，是否有什么高见？求解答！谢谢！ |
回复此楼» 猜你喜欢
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有184人回复
-
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有6人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
13楼2016-03-25 17:02:22
原海亮
木虫 (著名写手)
- 应助: 232 (大学生)
- 金币: 4607.4
- 散金: 3521
- 红花: 33
- 帖子: 1804
- 在线: 375.4小时
- 虫号: 1392705
- 注册: 2011-09-06
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
【答案】应助回帖
★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小秀子子: 金币+3 2016-03-22 19:33:16
感谢参与，应助指数 +1
小秀子子: 金币+3 2016-03-22 19:33:16
|
一方面在进行重新处理载体和片段时，建议将上次酶切处理过得载体片段也加入体系再次酶切进行连接转化，这样可以保证最后是有一部分经过两次酶切的，处理应该比较完全。另一方面，做菌液pcr，虽然简便但是常常会有些异常状况，最准确的方法应该是提取质粒做双酶切验证。祝好！ 发自小木虫Android客户端 |
2楼2016-03-21 16:24:30
3楼2016-03-21 20:19:46
star013 
新虫 (知名作家)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 1488.5
- 散金: 831
- 红花: 33
- 帖子: 5395
- 在线: 493.3小时
- 虫号: 1401381
- 注册: 2011-09-14
- 专业: 法学
4楼2016-03-22 08:17:24
