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求助！！短片段（169 bp）PCR扩增，用Takara La Taq酶，不出条带呀。。。。 已有5人参与
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 小白第一次发帖，各位大神见谅。。。。以前用普通的2×Taq PCR Mix扩增，它含的酶是Taq DNA Polymerase，扩增条带是169 bp，当时可以出条带，亮度可以。也送测了的，返回结果有的位点是双峰。 因为提的DNA是混合物，现在想做克隆看看混合物的成分，就换成了Takara的La taq，但是不出条带了呀。。。引物没变，PCR条件也没变。。。。 我的条件是这样的： （1）94℃ 5min （2）94℃ 30s （3）51 ℃ 30s （4）72℃ 45s （5）（2）-（4）39 （6）72℃ 10min （7）4℃ forever 求各位大神帮帮忙，看看有没有啥问题啊。。。。   有啥没说到的，各位大神尽管问。。。。。 |
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送红花一朵 |
双峰是我想要的，不是所有位点都是双峰，是几个位点是，别的位置是单峰。 然后，以前用LA扩500bp是没有问题的，那现在用别的酶是不是必须要加A尾以后连T载体呢？昨天有人和我说不加A尾也可以直接连，我就有点儿迷糊了。。。 刚开始做，好多不懂的，见谅见谅。。。 发自小木虫Android客户端 |
11楼2016-03-06 10:21:03
dragonhmw
铁杆木虫 (正式写手)
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2楼2016-03-06 07:24:03
fudan671
木虫 (著名写手)
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3楼2016-03-06 07:43:36
yilberg
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4楼2016-03-06 08:38:41
10