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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » DNA琼脂糖凝胶电泳图，条带W状，怎么回事
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1740OMG

新虫 (小有名气)

[交流] DNA琼脂糖凝胶电泳图，条带W状，怎么回事 已有6人参与

我们在做基因型鉴定。有WT、杂合子、纯合子3种基因型（400~700bp）。用的1.2%的琼脂糖凝胶，上样10uL。电泳120V，40min。之前很好，这次就这样的条带，换了电泳槽的缓冲液也没解决。 第一条是MAKER，跑的也不好。 大家帮我分析下。

DNA琼脂糖凝胶电泳图，条带W状，怎么回事
琼脂糖电泳图-W状.png
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1楼 2016-02-28 17:37:21
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自然_法则

银虫 (初入文坛)
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1740OMG: 金币+3, 谢谢 2016-02-29 15:24:28
从你这个图上来看，你的marker跑开了，只是所有的样都弯曲了，有两个方面的可能原因：1.胶浓度较高，关键是没有混匀就凝固了，导致凝胶在缓冲液里分布不均，你试试用1%的浓度配胶，同时注意摇匀后灌胶；2.电压不稳，导致跑胶过程中条带歪曲，也不用那么高的电压跑的，你试试恒流跑20—30mA，恒压显示一般为50-60V(这个跟电泳槽有关，具体的数据看你的电泳槽说明）。希望对你有帮助
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每一个结果都有与之关联的起因我称之为结果论
2楼2016-02-29 10:50:35
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Echo2017

银虫 (小有名气)
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引用回帖:
2楼: Originally posted by 自然_法则 at 2016-02-29 10:50:35
从你这个图上来看，你的marker跑开了，只是所有的样都弯曲了，有两个方面的可能原因：1.胶浓度较高，关键是没有混匀就凝固了，导致凝胶在缓冲液里分布不均，你试试用1%的浓度配胶，同时注意摇匀后灌胶；2.电压不稳， ...

有一个疑问，如果是胶浓度的问题，那有可能全部是规则的w吗？

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3楼2016-02-29 15:38:23
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vivd娟

金虫 (小有名气)
★
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应该是胶布均一吧 ，你要把胶煮沸几次才好。
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4楼2016-03-02 08:27:54
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凉爽的纯净水

新虫 (初入文坛)
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是不是用水冲冷却了？

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5楼2016-03-02 08:40:13
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1740OMG

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 凉爽的纯净水 at 2016-03-02 08:40:13
是不是用水冲冷却了？

没有用水冲来冷却，是在摇床上摇晃8分钟冷却的。每次煮沸3次，应该煮匀了吧。
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6楼2016-03-02 13:58:00
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边木殇

木虫 (小有名气)
★
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感觉是胶冷却的时候没有均匀冷却或者冷却时间太长，电压不稳或者过高，我们一般用100v
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7楼2016-03-02 14:11:24
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wuzhaoxiang

金虫 (初入文坛)
★
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这种情况基本可以断定是电压过高导致。
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8楼2016-03-02 15:29:58
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匿名

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1740OMG: 金币+2, 谢谢 2016-03-04 20:46:34
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9楼2016-03-02 15:51:53
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反正比函数

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
原因可能有三 第一电压太高 第二制胶时候泳道口不规整 第三 缓冲液没有及时更换

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10楼2016-03-02 15:58:28
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