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分类 共搜索到 2861 个相关话题(最多显示前5000个) 作者 最后发表
无机/物化 生物化学的这个东西该怎么搞呀
通过cDNA编码序列，获得推导蛋白质氨基酸序列。通过网业软件，预测pl、MW、亲/疏水性、跨膜区，信号肽、二级结构、空间构想模拟。设计原核(PET或PGEX系列载体)和真核(pCDNA3.1)表达引物，...
 柠栀17 2025-10-29 03:33
休闲灌水 GPC3克隆
HepG2是GPC3高表达阳性细胞，我提取了TotalRNA（已跑胶验证其质量没问题）并逆转录成cDNA，已cDNA为模板，用设计好的引物去进行克隆（GPC3完整序列从NCBI上获取，引物从其首尾设计，已进行...
 cyl-250368 2025-10-20 07:19
分子生物 GPC3克隆
HepG2是GPC3高表达阳性细胞，我提取了TotalRNA（已跑胶验证其质量没问题）并逆转录成cDNA，已cDNA为模板，用设计好的引物去进行克隆（GPC3完整序列从NCBI上获取，引物从其首尾设计，已进行...
 cyl-250368 2025-10-20 07:11
生物科学 RNA浓度测定及反转录详细步骤
将体系中所需的试剂量都×10，混合在一起配成RT2mix，在8连管中添加8μL的RT2mix孵育条件：设置PCR仪程序：若使用Oligo(dT)??引物或基因特异性引物引发cDNA合成，在42°C下孵育60分钟；...
 科研战神来了 2025-09-30 07:48
生物科学 PCR体系中六要素的作用
02模板DNA在普通PCR（聚合酶链式反应）中，模板DNA的来源多种多样，包括基因组DNA（gDNA）、互补DNA（cDNA）和质粒DNA等。不过，不同类型的DNA由于其组成和复杂度的不同，对于PCR扩增所需的...
 科研战神来了 2025-08-22 05:32
休闲灌水 PCR检测实验步骤
cDNA合成-反转录反应体系配制：在反应管中依次加入RNA模板、反转录酶、随机引物或Oligo(dT)引物、dNTPs、缓冲液等，总体积一般为20μl。反转录反应条件：通常先在65℃下孵育5分钟使RNA变性...
 乐奥贝（实验外 2025-07-01 04:05
生物科学 PCR实验问题全攻略，轻松搞定实验难题
PCR引物设计的黄金法则保守区设计：在模板cDNA的保守区内设计引物，确保引物的通用性。引物长度：引物长度15-30个碱基最佳，常用18-27bp。GC含量和Tm值：GC含量40%-60%，Tm值接近72℃，确保...
 毕合生物2024 2025-06-20 09:14
生物科学 α-银环蛇毒素的合成与表达、相关研究案例
?基因克隆与表达：利用SMART技术反转录合成银环蛇毒腺cDNA，可克隆并测定α-银环蛇毒素基因。研究人员曾得到14种mRNA序列，并将其中一种新的α-银环蛇毒素基因亚克隆到原核表达载体pQE30a...
 丰度Bio君 2025-06-19 06:49
休闲灌水 siRNA转染实验流程
目的基因沉默效率检测-qRT-PCR：提取细胞总RNA，逆转录为cDNA后，通过qRT-PCR检测目的基因mRNA表达水平，评估siRNA干扰效果。Westernblot：提取细胞总蛋白，通过Westernblot检测目的蛋白...
 乐奥贝（实验外 2025-06-09 10:08
休闲灌水 质粒转染实验流程
质粒转染实验流程实验准备1.?材料：目的质粒、待转染细胞、细胞培养基、无...mRNA检测（如RT-qPCR）：收集转染后的细胞，提取总RNA，反转录为cDNA后，利用RT-qPCR检测目的基因mRNA表达量变化。
 乐奥贝（实验外 2025-05-22 03:54
微生物 链霉菌
理论上RNA不能PCR出基因，反转录出cDNA才会PCR出我的基因，我现在没有办法判断这个蛋白会不会表达翻译，怎么解决这个问题，或者有什么新的方法能说明这个蛋白能表达翻译出来
 2019013672 2025-04-01 05:20
生物科学 PCR实验：分子生物学的“超级工具”
二、PCR实验的关键组成：缺一不可模板（Template）模板就是你要复制的DNA片段，可以是基因组DNA、质粒DNA、cDNA，甚至细菌或组织样本。就像给打印机准备的“原稿”，没有它，啥也复制不出来...
 毕合生物2024 2025-03-26 10:14
生物材料 转录组可编程实时测序新方法
通过滚环扩增与多轮测序纠错，即cDNA的多轮通读与纳米孔测序错误校正，便可以实现单分子水平的高精度检测。在应用验证中，PROFIT-seq在临床样本检测中展现出显著优势：对痰液中肺炎病原体的...
 中芯启恒 2025-03-17 07:46
文献求助 急求文献：Characterization of Fscl cDNA for a Mouse Sperm ...
KerryD.Fulcher,ChisatoMori,JeffreyE.Welch,DeborahA.O’Brien,DavidG.Klapper,E.M.EddyCharacterizationofFsclcDNAforaMouseSpermFibrousSheathComponentBiologyofReproduction1995Volume...
 屎味儿咖啡 2025-02-24 08:36
文献求助完结子版 求CNKI文章一篇
[1]胡雅儿,施菊,夏宗勤.M2受体cDNA转染CHOm2细胞的某些药理学和生物学特性[J].核技术,1999,(11):642-646.[1]胡雅儿,施菊,夏宗勤.M2受体cDNA转染CHOm2细胞的某些药理学和生物学特性[J].核...
 XQQ12345 2024-10-23 03:59
动植物 空间组学是什么？
在1995年固相cDNA微阵列捕获技术首次报道，而后这种技术以另一种形式被应用于当前空间转录组技术中，如空间转录组学（ST）、10XVisium、Slide-seq及Stereo-seq。空间组学哪家强现行的空间...
 空间组学深耕人 2024-09-12 09:43
休闲灌水 看到一个有意思的文献，分享一下
在组织优化实验中对cDNA进行荧光显微镜成像，表明了捕获的转录本与组织形态相关性良好，令人惊奇的是在所有基质中进行MALDIMSI成像后mRNA依旧保存较好。方法重复性验证?进一步对本方法的...
 科研大牛马 2024-09-12 07:59
生物科学 荧光素酶表达的淋巴瘤NCG小鼠模型的构建
抽取病毒总RNA，反转录成cDNA，以cDNA为模板，重复3个孔，测得Ct为26.78，计算拷贝数为211，稀释倍数为1×105，计算出病毒滴度为2×107/mL。03Raji阳性细胞的筛选和稳定表达荧光素酶的Raji...
 YX科研小助理 2024-09-03 05:09
新药研发 干货分享|PCR实验，需要哪些组分/条件，值得收藏！
模板DNA：来源比较广，用于复制的PCR模板可以是任何DNA来源，如基因组DNA（gDNA）、互补DNA（cDNA）和质粒DNA。不过，DNA的组成或复杂度会影响PCR扩增的最佳起始量。例如，在起始量为50?L...
 生物医药实验外 2024-08-29 01:41
生物科学 你是否也有这个疑惑？qPCR提RNA不提DNA
提高灵敏度和特异性：cDNA的合成还可以提高qPCR的灵敏度和特异性，因为cDNA的合成可以包括去除原始RNA模板的步骤，这有助于减少扩增过程中的背景噪声。技术兼容性：逆转录产生的cDNA可以...
 huangyan.88. 2024-08-29 01:38
生物科学 干货分享｜RNA m6A甲基化修饰和特定基因m6A位点的检测方法
首先，RNA不能直接扩增，必须首先逆转录成cDNA。但m6A结构不影响正常碱基配对，m6A位点信息可能在逆转录过程中丢失。其次，尽管m6A是真核mRNA中含量最丰富的修饰，但其绝对含量非常低，并且...
 chance℃ 2024-08-07 03:59
医学 提取高质量的RNA！RNA提取实验操作步骤
cDNA文库构建要求RNA完整而无酶反应抑制物残留;Northern对RNA完整性要求较高,对酶反应抑制物残留要求较低;RT-PCR对RNA完整性要求不太高,但对酶反应抑制物残留要求严格。因此,明确实验目的是...
 科研虫子小助手 2024-06-11 08:44
分子生物 干货分享|你是否也有这个疑惑？qPCR提RNA不提DNA
提高灵敏度和特异性：cDNA的合成还可以提高qPCR的灵敏度和特异性，因为cDNA的合成可以包括去除原始RNA模板的步骤，这有助于减少扩增过程中的背景噪声。技术兼容性：逆转录产生的cDNA可以...
 科研顾问_Gu 2024-06-06 06:56
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