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最后发表
分子生物
CETSA实验验证药物作用靶点
有人做过CETSA实验吗?在
gapdh
一致的情况下,DMSO组的高温度处理组目的蛋白反而高于低温度处理组,是我温度处理不均匀吗,加热3分钟后室温平?3分钟。
全村的狗
2025-11-24 09:09
生物科学
揭秘WB实验内参抗体的秘密
使用率最高的内参之一~
GAPDH
(甘油醛-3-磷酸脱氢酶)分子量约37kDa,参与糖酵解过程。就像城市中无处不在的便利店,
GAPDH
在大多数细胞中都很稳定且丰富!超级常用!α-Tubulin(α-微管...
毕合生物2024
2025-11-20 06:36
生物科学
内参抗体使用的常见问题与解决方案
解决方案:预实验验证-在正式实验前先验证处理条件对几种内参的影响多内参联用-同时使用2-3种内参,如
GAPDH
+β-actin+α-Tubulin换内参种类-药物处理实验考虑使用HPRT1或PPIA等新型内参全...
毕合生物2024
2025-11-18 12:27
生物科学
紧急补救!WB阴性对照问题的快速解决方案&...
我之前用某品牌的
GAPDH
抗体阴性对照总有条带,换了另一家的就完全没问题了。建议:联系2-3家不同公司索要小样试用查看其他实验室有无同款抗体可借用测试阅读抗体说明书中的推荐使用条件真实...
毕合生物2024
2025-10-21 08:06
生物科学
WB实验常见内参抗体
部分“β-actin不稳定”的样本如在脂肪细胞中,β-actin表达可能较低,而
GAPDH
表达更稳定,此时用
GAPDH
抗体作为内参更合适。慎用情况:在细胞缺氧、以及糖尿病模型中一般不用
GAPDH
。03β-...
科研战神来了
2025-09-29 08:29
生物科学
实验解惑|WB实验常见内参抗体一文全解析
部分“β-actin不稳定”的样本如在脂肪细胞中,β-actin表达可能较低,而
GAPDH
表达更稳定,此时用
GAPDH
抗体作为内参更合适。慎用情况:在细胞缺氧、以及糖尿病模型中一般不用
GAPDH
。03β-...
科研战神来了
2025-09-22 03:39
生物科学
WB 实验室趣事:分享你的条带灵异事件&...
3??"消失的内参"之谜最让我崩溃的是,有次实验所有目的蛋白条带清晰可见,但
GAPDH
内参竟然完全消失了!明明加了抗体啊!后来才意识到是我把内参抗体和二抗放在一起,结果.忘记摇匀了!...
毕合生物2024
2025-09-18 08:41
生物科学
WB实验新手指南:如何选择合适的内参
全细胞:常用的内参蛋白包括
GAPDH
、β-肌动蛋白(β-actin)和β-微管蛋白(β-tubulin)。这些蛋白在大多数哺乳动物细胞中表达稳定,且分子量适中,易于检测。128311;细胞核:对于核蛋白的...
科研战神来了
2025-08-25 12:25
生物科学
膜蛋白提取
提细胞膜蛋白,WB验证用ATP泵做内参,但发现也有
GAPDH
,ATP泵齐,但是
GAPDH
不齐怎么办?重新提蛋白吗?
dmrly
2025-08-18 02:31
分子生物
求助 circrna表达量选取以及RnaseR实验
内参用的
GAPDH
在16-18左右,我用文献里的一个circRNA的引物做对照,这个circRNA找的不够好引物不特异,ct值也在30左右。我想咨询一下相关大佬,circRNA的绝对表达量都这么低的吗,还是有...
wangershui
2025-07-29 01:08
生物科学
WB内参怎么选?读懂不踩雷!
肌肉样本tubulin会翻车,actin反而稳特殊样本避坑指南缺氧、糖尿产
GAPDH
表达狂飙,直接pass抗癌药物处理→tubulin被药物影响,actin/
GAPDH
更稳红细胞、分泌液→细胞结构都没有,常规内参全...
毕合生物2024
2025-07-16 02:31
医学
WB实验翻车现场?一文搞定常见问题+急救指南!
先检查样本是否全部降解,或直接更换内参抗体(比如β-actin换成
GAPDH
)!二、背景噪音大:膜上“繁星点点”可能原因:封闭不充分:封闭时间短、封闭剂浓度低或类型不匹配。??急救:延长...
MDL科研
2025-07-14 06:57
新药研发
WB实验原理及流程
四、注意事项对照设置:需包含阴性对照(无目标蛋白样本)、内参(如β-actin/
GAPDH
)及空白对照。抗体选择:验证一抗特异性,避免交叉反应。时间控制:转膜时间过长可能导致小分子量蛋白穿...
夏末~易科
2025-05-30 05:42
分子生物
WB实验原理及流程
四、注意事项对照设置:需包含阴性对照(无目标蛋白样本)、内参(如β-actin/
GAPDH
)及空白对照。抗体选择:验证一抗特异性,避免交叉反应。时间控制:转膜时间过长可能导致小分子量蛋白穿...
夏末~易科
2025-05-19 01:52
文献求助
CRISPR knock-in of a chimeric antigen receptor into
GAPDH
3'...
LiujiangDai#1,PengchaoZhang#12,XiangyunNiu12,XixiaPeng1,RabiatuBakoSuleiman12,GuizhongZhang34,XiaochunWan56CRISPRknock-inofachimericantigenreceptorintoGAPDH3\'...
圈圈圆圆吧啦
2025-04-15 12:29
生物科学
线粒体功能障碍通过HIF-1α介导的糖酵解重编程促进前体细胞向终...
Tex细胞细胞外酸化率(ECAR)的增加与营养转运蛋白和糖酵解酶如Slc2a3(编码GLUT328)、Aldoa和
Gapdh
的表达增加相关(图1k)。与前体细胞相比,特克斯细胞的ECAR:OCR比值更高,这进一步支持了T...
YX科研小助理
2024-10-14 02:14
论文投稿
在线等,关于WB的,各位请问有什么办法吗,感谢小木虫,感谢虫友...
inwesternblotexperiment,thetargetproteinandtheloadingcontrol(e.g.
gapdh
)mustberunonthesamegel.这是修改文章,杂志提出的要求,目前这里有点小困难,虫友们麻烦支招了哈&128591;128591;
sdgame0
2024-10-07 01:53
论文投稿
在线等,感谢小木虫,感谢虫友们了哈,
inwesternblotexperiment,thetargetproteinandtheloadingcontrol(e.g.
gapdh
)mustberunonthesamegel.请问各位,这个怎么处理呢,目前没在一张膜上,有什么办法吗,各位monash2011
sdgame0
2024-10-07 12:35
分子生物
终极攻略|WB内参的选择
哺乳动物的组织或者细胞样本,通常选择β-actin、Tubulin、
GAPDH
、LaminB、PCNA、Na+K+-ATPase等。植物来源实验样本则可以选择Plantactin、Rubisco等。其他来源样本研究较少,所以就应该...
科研战神·王
2024-05-21 03:30
生物科学
终极攻略|WB内参的选择
哺乳动物的组织或者细胞样本,通常选择β-actin、Tubulin、
GAPDH
、LaminB、PCNA、Na+K+-ATPase等。植物来源实验样本则可以选择Plantactin、Rubisco等。其他来源样本研究较少,所以就应该...
科研战神·王
2024-05-07 02:03
生物科学
干货分享|Western blot怎么那么多内参?你选对了吗
图片推荐使用一些常见的内参,如β-actin、
GAPDH
和HSP90。这些内参在大多数细胞类型中都有稳定表达,且分子量适中,容易检测。在选择内参时,还需要注意一些实验细节。比如,确保内参和目标...
科研实验_研实
2024-04-26 05:17
文献求助
万方博士学位论文求助
廖丽萍糖酵解代谢酶
GAPDH
和PGK1抑制剂发现及作用机制研究中国科学院大学20212021https://d.wanfangdata.com.cn/thesis/Y3848501万方数据
塔矢亮
2024-04-17 02:56
药学
WB出现部分阴性结果,可能原因是啥呀
如题,WB结果连续多次出现部分阴性结果:较大分子量(>55kDa)的目的蛋白一直未出现目的条带,40左右kDa的目的蛋白和内参
GAPDH
均能出现条带,可能原因是啥呀,(大分子量的目的蛋白在之前...
2k1135
2024-04-03 09:36
医学
qPCR的内参,你选对了吗?
常用的内参基因包括
GAPDH
、β-actin、18sRNA、28sRNA、B2M、ACTB、SDHA、HPRT1、ARBP内参基因等。二、为什么相对定量必须使用内参?那内参基因与相对定量又有什么样的关系呢?我们通过以下...
超困困狗g
2024-03-28 01:11
分子生物
qPCR的内参,你选对了吗?
常用的内参基因包括
GAPDH
、β-actin、18sRNA、28sRNA、B2M、ACTB、SDHA、HPRT1、ARBP内参基因等。二、为什么相对定量必须使用内参?那内参基因与相对定量又有什么样的关系呢?我们通过以下...
YX科研小助理
2024-03-07 12:21
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