| 查看: 1122 | 回复: 9 | |||
[交流]
质粒提取电泳条带不正确已有5人参与
|
|
想请教一下，提完质粒跑电泳，质粒大小是5000bp，但是条带只有第一次电泳正确了，后面用这管提取的质粒再次电泳一直在8000bp，没有目的条带，重新摇菌提取也是在8000bp，这是怎么回事呀 用的天根质粒小提试剂盒 双酶切再次电泳也是8000多bp，然后接着拿去做酶切连接转化，验证的质粒构建是否成功的时候，再次双酶切，还是只有8000多的条带，没有插入的片段（700bp），但用质粒pcr，又能p出插入片段的条带 发自小木虫IOS客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
球磨纳米粒子条件
已经有6人回复
-
球磨分散剂
已经有4人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有161人回复
-
阴阳离子交换剂！！！！
已经有3人回复
-
二苄基磷酰氯，磷酸接酚羟基，
已经有11人回复
-
二苄基磷酰氯，磷酰氯
已经有10人回复
-
酸酐或者羧酸酰氯化
已经有15人回复
-
酚羟基接入磷酸，磷酸酯化
已经有26人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
2楼2022-07-19 08:06:28
3楼2022-07-19 10:05:32
|
就是提取完质粒去电泳，条带第一次正确，第二次就不对了，看了网上的分析，就酶切后再去跑电泳，还是条带不正确，用的都是用一次提取的质粒。就是不明白为什么条带会突然不正确，不敢往下做 发自小木虫IOS客户端 |
4楼2022-07-19 10:07:37
5楼2022-07-19 10:52:44
|
谢谢，就是我重新提取了一遍质粒，然后还是条带不正确，我试着继续往下做了，插入目的片段，酶切连接转化，通过提取转化的菌的质粒，进行pcr，可以得到插入片段的条带，但是还是得不到正确的质粒大小的条带，我感觉像没做出来，又像做出来了 发自小木虫IOS客户端 |
6楼2022-07-19 10:58:38
7楼2022-07-19 13:32:07
8楼2022-07-21 15:47:56
9楼2022-07-30 15:57:17
乌克兰跑男
铜虫 (正式写手)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1588
- 散金: 420
- 帖子: 663
- 在线: 55.1小时
- 虫号: 29162179
- 注册: 2022-03-15
- 性别: GG
- 专业: 水产生物免疫学与病害控制
10楼2022-08-07 03:05:57
80