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质粒提取电泳条带不正确已有5人参与
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想请教一下，提完质粒跑电泳，质粒大小是5000bp，但是条带只有第一次电泳正确了，后面用这管提取的质粒再次电泳一直在8000bp，没有目的条带，重新摇菌提取也是在8000bp，这是怎么回事呀 用的天根质粒小提试剂盒 双酶切再次电泳也是8000多bp，然后接着拿去做酶切连接转化，验证的质粒构建是否成功的时候，再次双酶切，还是只有8000多的条带，没有插入的片段（700bp），但用质粒pcr，又能p出插入片段的条带 发自小木虫IOS客户端 |
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2楼2022-07-19 08:06:28
3楼2022-07-19 10:05:32
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就是提取完质粒去电泳，条带第一次正确，第二次就不对了，看了网上的分析，就酶切后再去跑电泳，还是条带不正确，用的都是用一次提取的质粒。就是不明白为什么条带会突然不正确，不敢往下做 发自小木虫IOS客户端 |
4楼2022-07-19 10:07:37
5楼2022-07-19 10:52:44
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谢谢，就是我重新提取了一遍质粒，然后还是条带不正确，我试着继续往下做了，插入目的片段，酶切连接转化，通过提取转化的菌的质粒，进行pcr，可以得到插入片段的条带，但是还是得不到正确的质粒大小的条带，我感觉像没做出来，又像做出来了 发自小木虫IOS客户端 |
6楼2022-07-19 10:58:38
7楼2022-07-19 13:32:07
8楼2022-07-21 15:47:56
9楼2022-07-30 15:57:17
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10楼2022-08-07 03:05:57
80