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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 质粒提取电泳条带不正确
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Hxiaopl

新虫 (初入文坛)

[交流] 质粒提取电泳条带不正确 已有5人参与

想请教一下，提完质粒跑电泳，质粒大小是5000bp，但是条带只有第一次电泳正确了，后面用这管提取的质粒再次电泳一直在8000bp，没有目的条带，重新摇菌提取也是在8000bp，这是怎么回事呀

用的天根质粒小提试剂盒

双酶切再次电泳也是8000多bp，然后接着拿去做酶切连接转化，验证的质粒构建是否成功的时候，再次双酶切，还是只有8000多的条带，没有插入的片段（700bp），但用质粒pcr，又能p出插入片段的条带

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1楼 2022-07-18 23:55:28
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Hxiaopl

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 司静Jing. at 2022-07-19 10:52:44
建议不要往下做 重新仔细做一遍吧 注意每一个环节...

谢谢，就是我重新提取了一遍质粒，然后还是条带不正确，我试着继续往下做了，插入目的片段，酶切连接转化，通过提取转化的菌的质粒，进行pcr，可以得到插入片段的条带，但是还是得不到正确的质粒大小的条带，我感觉像没做出来，又像做出来了

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6楼2022-07-19 10:58:38
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围脖

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
感觉你表述不清，个人感觉，非专业

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2楼2022-07-19 08:06:28
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Hxiaopl

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 围脖 at 2022-07-19 08:06:28
感觉你表述不清，个人感觉，非专业

刚学分子实验，在自己摸索

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3楼2022-07-19 10:05:32
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Hxiaopl

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by Hxiaopl at 2022-07-19 10:05:32
刚学分子实验，在自己摸索
...

就是提取完质粒去电泳，条带第一次正确，第二次就不对了，看了网上的分析，就酶切后再去跑电泳，还是条带不正确，用的都是用一次提取的质粒。就是不明白为什么条带会突然不正确，不敢往下做

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4楼2022-07-19 10:07:37
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