帖子
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 站内搜索
431/212下一页
显示全部
分类 共搜索到 43 个相关话题(最多显示前5000个) 作者 最后发表
分子生物 干货分享|关于质粒提取的那些事儿
虽然质粒提取是非常简单的操作，但是很多人对于其中的原理并非清楚。只知道在使用试剂盒的时候，加入溶液1，2，3，不知道溶液中含有的具体成分，也不清楚，每一种成分所起到的作用。细胞中...
 科研顾问_Gu 2024-05-07 06:38
分子生物 关于质粒提取的那些事儿
虽然质粒提取是非常简单的操作，但是很多人对于其中的原理并非清楚。只知道在使用试剂盒的时候，加入溶液1，2，3，不知道溶液中含有的具体成分，也不清楚，每一种成分所起到的作用。细胞中...
 科研实验_研实 2024-05-07 01:03
生物科学 干货分享|关于质粒提取的那些事儿
虽然质粒提取是非常简单的操作，但是很多人对于其中的原理并非清楚。只知道在使用试剂盒的时候，加入溶液1，2，3，不知道溶液中含有的具体成分，也不清楚，每一种成分所起到的作用。细胞中...
 超困困狗g 2024-05-07 01:58
生物科学 干货分享｜关于质粒提取的那些事儿
虽然质粒提取是非常简单的操作，但是很多人对于其中的原理并非清楚。只知道在使用试剂盒的时候，加入溶液1，2，3，不知道溶液中含有的具体成分，也不清楚，每一种成分所起到的作用。细胞中...
 MDL实验室 2024-05-06 09:55
生物科学 质粒提取的小技巧
现在用质粒提取试剂盒非常方便，而且菌体培养后，可以多管浓缩提取，...双酶切制备克隆插入片段的载体，最好选择带有外源片段的质粒，是否酶切完全，从电泳条带的分子量上可以比较明确地判断。...
 Sh毕合生物 2024-01-25 12:04
生物科学 质粒提取的小技巧
现在用质粒提取试剂盒非常方便，而且菌体培养后，可以多管浓缩提取，...双酶切制备克隆插入片段的载体，最好选择带有外源片段的质粒，是否酶切完全，从电泳条带的分子量上可以比较明确地判断。...
 Sh毕合生物 2023-09-21 05:49
生物科学 一文了解引物的相关问题
引物合成也不可能保证100%正确。...但是制备PAGE电泳，上样量都是非常大，电泳时的条带非常宽，带与带之间有重叠，分辨率已下降，电泳后割带回收目的引物时，很难说不割到差别仅几个碱基的引物...
 科研小努力 2023-08-14 06:21
分子生物 经验分享|一文了解引物的相关问题
引物合成也不可能保证100%正确。...但是制备PAGE电泳，上样量都是非常大，电泳时的条带非常宽，带与带之间有重叠，分辨率已下降，电泳后割带回收目的引物时，很难说不割到差别仅几个碱基的引物...
 球场下雪了 2023-06-15 03:26
休闲灌水 最常用的生物实验技术及原理
在阅读框正确且不影响...但超螺旋共价闭合环状的两条互补链不会完全分离,当用pH4.8的NaAc高盐缓冲液去调节其pH至中性时,变性的质粒DNA又恢复原来的构型,保存在溶液中,而染色体DNA不能复性而...
 略施小计 2022-08-05 08:05
分子生物 质粒提取电泳条带不正确
想请教一下，提完质粒跑电泳，质粒大小是5000bp，但是条带只有第一次电泳正确了，后面用这管提取的质粒再次电泳一直在8000bp，没有目的条带，重新摇菌提取也是在8000bp，这是怎么回事呀用的...
 Hxiaopl 2022-07-18 03:28
休闲灌水 最常用的生物实验技术及原理
在阅读框正确且不影响...但超螺旋共价闭合环状的两条互补链不会完全分离,当用pH4.8的NaAc高盐缓冲液去调节其pH至中性时,变性的质粒DNA又恢复原来的构型,保存在溶液中,而染色体DNA不能复性而...
 略施小计 2022-07-11 04:30
微生物 连接经验分享
有时手工小提或粗提的质粒酶切效果不好，这可能是提取的不够纯或者内切酶品质不好...一、若切完的目的vector和没切的vector的长度相差较大，电泳条带离的远，这个对照能检测酶切和回收的质量。...
 北京艾柏森 2021-09-13 01:36
分子生物 史上最全点突变实操
在MasterP还是学生时期，就不太明白简单如质粒提取试剂盒内各个成分的作用，只知按照说明书无脑一顿操作就能提取到自己想要的...一个引物带有野生型序列，而另一条引物含有所需的突变，并且...
 xuyuzhi 2019-05-20 01:13
转基因 【干货】-Southern blot专场
为了鉴定携带条件性satb1等位基因的供体质粒通过同源重组方式整合到小鼠的satb1特异性位点...经内源egfp探针杂交显示为一条带，说明条件性satb1等位基因以单拷贝插入到靶基因座上（见图3c）。...
 百奥赛图 2019-01-10 02:21
分子生物 纯干货丨大神解答关于无缝克隆技术的常见问题
（3）PCR扩增目的片段后进行胶回收纯化，确定其条带的大小和单一性；（4）如果重组后质粒在8kb以上...21无缝克隆的连接产物转化细菌后产生大量的菌落，摇菌提取后的质粒大小不一样，如何解决？...
 华联科生物 2018-10-30 08:58
分子生物 如何提取高质量核酸
对全血、骨骼、植物等提取DNA在不PCR扩增的情况下能在凝胶电泳中看到较为明亮的条带。动态针分割线貳核酸提取磁珠FQA1.在进行游离核酸...3.质粒提取磁珠试剂盒（1）是否能够进行大量样本提取？...
 华联科生物 2018-09-27 08:22
分子生物 如何快速高效地建立基因敲除细胞系？
酶切：用限制性内切酶BbsI酶切PX458或PX459敲除质粒，琼脂糖凝胶电泳验证酶切效果并回收酶切后的质粒待用；连接：用T4连接酶将退火后...4.为什么有时候做基因型鉴定时，PCR扩增不出目的条带？...
 华联科生物 2018-09-17 07:35
硕博家园 pMG36e质粒空载可以提取，重组后提取不出来!
甘油保藏后摇菌进行质粒提取，但是培养液很臭，很浑浊，不太正常。加了p2以后溶液并未粘稠清亮，加了p3后的沉淀很奇怪，提取的质粒跑电泳没有条带。此质粒是低拷贝质粒，是加大了菌液量提取...
 金色海豚 2018-09-06 04:22
分子生物 pMG36e重组质粒提取出现问题!
甘油保藏后摇菌进行质粒提取，但是培养液很臭，很浑浊，不太正常。加了p2以后溶液并未粘稠清亮，加了p3后的沉淀很奇怪，提取的质粒跑电泳没有条带。此质粒是低拷贝质粒，是加大了菌液量提取...
 金色海豚 2018-09-06 04:48
分子生物 求教，如何将长基因片段（7200bp）连接平末端载体上？
有时连接出现少量菌斑，提取质粒大小不一，且均不正确。...但是我连接前跑了电泳进行过验证，结果显示插入的目的基因为一条均一清晰的条带，酶切插入片段也可以得到正确的酶切产物，因此理论上...
 oldtimeyoung 2018-04-06 06:21
分子生物 关于重组质粒跑胶条带的困惑
重组菌测序正确后，对5ml菌液提取质粒，发现质粒跑胶的结果不太对劲。图中前面五个是新提取的质粒条带，后面四个为之前的。为什么会这样呢，前面几个为什么那么多的带呢。求指教！[eimg]...
 prthefu 2017-03-23 04:47
分子生物 基因敲除过程中的质粒验证问题。
但是每次跑电泳及单双酶切均得不到条带或者得到多条不正确杂带。但是我构建好的重组质粒为阳性对照一起点样时正确的。所以...提取了三个菌落加入氯霉素扩大培养后的质粒，培养时间12-13小时。...
 lxq234 2016-12-30 06:05
硕博家园 菌液测序常见的问题
PCR产物首先必须用Agarose胶电泳，将特异扩增的条带切割下，然后纯化。使用凝胶回收试剂盒回收，产物用ddH2O溶解。7．PCR产物直接测序的好处？...通常的提取质粒的试剂盒会提供一个Elution...
 晋鹏 2016-01-24 10:45
分子生物 请问为什么测序对了的重组质粒，双酶能切出其他条带
这个是提取的质粒的照片之后将此质粒转化入其他BL21和DH5a，测序也都正确；...请问为什么在1000多和3000多的地方也有条带呢？...
 sdjnyxn123 2015-12-25 02:24
分子生物 包涵体纯化和复性总结
我判断细胞破碎不完全是因为，在将破碎后样品离心分离上清和沉淀跑SDS-PAGE观察，发现在细胞碎片组分中除了经常出现的一两条带以外...通常的洗涤方法一般是洗不干净的，我以前是这么做的，先把...
 hajierlove 2014-11-23 12:17
431/212下一页