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金色海豚

金虫 (小有名气)

[求助] pMG36e重组质粒提取出现问题!

新买的天根质粒小提试剂盒,重组质粒已经测序正确。甘油保藏后摇菌进行质粒提取,但是培养液很臭,很浑浊,不太正常。加了p2以后溶液并未粘稠清亮,加了p3后的沉淀很奇怪,提取的质粒跑电泳没有条带。
此质粒是低拷贝质粒,是加大了菌液量提取的,操作上也没什么问题,宿主是大肠杆菌dh5a。
重新划线后提取质粒也还是一样的结果。是什么原因呢,跪求大神们答疑解惑~

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KM石头

金虫 (正式写手)

我最近也在构建pmg36e载体,一直构建不出来,想问一下,楼主是怎么构建成功的,红霉素浓度是多少;至于楼主的问题,是不是楼主摇菌时间过长导致的,听别人说,提高红霉素浓度会好一点不知道是不是
2楼2018-09-21 18:58:21
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xinxinjin

银虫 (职业作家)

3楼2019-05-20 10:45:30
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