进行过PCR，请给你的目的基因一个家——质粒。主要特点：原始质粒3条带或更多带。酶切质粒切开后跑的比原始质粒的超螺旋结构慢。原始质粒的超螺旋结构展示的BP大小比质粒长度的预期大小要校...

PCR扩增得到一个目的片段，但是一直都扩增不出来，最近在找相关的原因，首先RNA电泳图是有点弥散的，可能是RNA有降解，其次用内参引物跑了PCR，电泳图能得到18SrRNA和GADPH片段的条带，...

重构质粒后跑了菌液pcr，但是没用通用引物跑，而是自己的引物，结果跑出来条带和目标相符，送去测序发现是空载那么有两种可能，1...假阳性但是假阳性为什么会跑出和目的基因大小一样的片段呢，...

提完质粒跑电泳，质粒大小是5000bp，但是条带只有第一次电泳正确了，后面用这管提取的质粒再次电泳一直在8000bp，没有目的条带，重新摇...没有插入的片段（700bp），但用质粒pcr，又能p出插入...

这次PCR的目的是扩增一段DNA序列然后插入到质粒里，导入细胞做同源...现在的问题是，用普通的taq酶（premix）能跑出来条带，但是因为扩增的可能不保真，而且末端加了T，所以没办法用来连接。...

若条带有弥散，即自目的条带以下有拖痕，不是清晰利落的一条带，则质量不好。...如果你是双酶切，切完的vector和没切的vector的长度相差不大，或跑电泳这两种跑不很开，就要做这个对照。...

但是菌液pcr就是跑不出条带，一个模糊的条带都没有，求助各位大神是哪里出了问题，如果是空载自连的话，我挑的12个菌都没有条带，而且我连接目的基因与载体的摩尔比是10：1，感觉不太可能。...

单酶切构建了一个质粒，pcr跑出了目的基因和质粒基因的条带，现在提质粒酶切后，只有质粒的条带，目的片段的条带看不到了，应该怎么做呢，提高质粒浓度再酶切可以吗？还是pcr结果已经能说明...

纯菌菌液提取的基因组dna作为模板，25微升体系，目的条带片段大小约350bp，上周都能扩到清晰目的条带，但这周重新跑就一直扩不出来了，只有杂带，marker2000很...PCR反应条件为：94℃/10min;...

跑了好几天PCR，都跑不出带来，我以为是引物有问题，我用了一个旧的曾经跑出过带的DNA样本，以及3个新提取的DNA样本跑PCR，结果旧DNA样本跑出了条带，新DNA样本没跑出目的条带，就是点样孔...

向各位大神求助，最近总是跑不出目的条带，引物二聚体特别亮，marker跑出来没有问题,这是什么原因呢我用的pcr体系10μL,引物各0.5μL,dna模板1μLdd水3μL,2×Raquelmix5μL胶图中的2-7泳道...

8.电泳时使用dna分子量标准品（指示是否pcr失败或条带跑出凝胶或拍照系统失败）。9.当扩增很长的、gc含量高的模板时或容易产生...4.扩增产物出现多条带（1）引物用量偏大，引物的特异性不高。...

和同学用的一样的大肠杆菌菌液同学做的鉴定试验都跑出了目的条带且成功（所以感觉不是菌液的问题）我做的耐药基因检测每次都有很多杂带用的引物是文献里找的且他们都成功了温度是结合了文献...

各位大神，核酸浓度为150多ng每微升的目的基因跑完pcr在电泳...酶切连接后做pcr验证电泳发现没有出条带，说明目的基因没有连接上，可是操作都是很仔细的，不知道是为什么，还有就是胶回收的...

qPCR用融合基因A的引物能正常扩增，且相对表达量比空载组高3000倍，PCR产物琼脂糖凝胶电泳也能看到明显过表达的条带。由于没有该...1）为何基因层面过表达明显但蛋白层面几乎看不出过表达？...

2端的ITR很有可能会互补形成“snapback”结构而在电泳时跑的很快，若存在Rosa26-Luc包装AAVHSC15病毒载体双链，会通过SpeI酶切后经过southernblot得到2783bp目的条带。很明显，D图第5个孔都...

之前梯度的时候跑出来了想要的条带，这几天在同样的温度下怎么都跑不出来，只有二聚体，请各位给看一下什么情况，体系是buffer2.5dntp2.0mg1.5cdna1f1r1extaq0.2ddh2o补齐至25pcr体系是94...

目的条带在2800bp,引物合成单上两条引物tm值相差不大，均值52...之前可以扩出目的条带来，已验证不是模板和引物的问题1%的胶marker跑的很清楚，没有弥散，应该不是电泳的问题，那么反应体系出...

但是使用以前之前有的cDNA文库进行目的基因扩增，然后琼脂糖电泳并未跑出目的条带，所以想采用别的cDNA序列进行扩增。因为我目前...利用已经合成的引物进行PCR，然后进行琼脂糖电泳，查看能否...

我们跑的是1.5％的琼脂电泳，marker用的2000的，最终结果是，除了...但只跑出一管的条带，且大小与预计大小相差甚远)求助，我们的目的是鉴定细胞中确实有某种rna特异性表达，应该从哪里下手呢?...

NCBI没有其序列，我就用其他鱼的该基因的序列设计的引物，以CDNA为模板，引物合成回来后跑PCR，经过条件摸索有两次是可以扩出我的目的条带的，后来我又用同样的反应条件再也扩增不出来了。...

技术帮我设计的引物，合成回来后我跑了梯度PCR，刚开始是可以扩出来二聚体以外的条带的，但不太像目的条带，因此又按相同的条件扩了下，后来...因为引物二聚体非常严重，不加模板都可以扩出二...

降落PCR代表了一种完全不同的PCR优化方法，它不是用许多反应管和每管用不同的试剂浓度和循环参数，而是用一个...引物用量过多，容易导致引物二聚体（电泳时位于前方不成条带的小片段）的出现。...

菌长不出来，指导老师认为是切胶回收的胶里有抑制连接的物质...没有用氯仿除酚，盐加过量，这些可能导致出不来，但实际上这样酚抽完跑电泳是能看到目的片段条带的。后来按照老师说的改正了酚抽...

想问下，为什么融合完以后的基因片段，回收以后会跑出好多条带了呢？反而目的片段就不多了，这是什么情况？