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pcr跑不出目的条带 已有4人参与
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之前梯度的时候跑出来了想要的条带，这几天在同样的温度下怎么都跑不出来，只有二聚体，请各位给看一下什么情况，体系是buffer2.5 dntp2.0 mg1.5 cdna1 f1 r1 extaq0.2 ddh2o补齐至25 pcr体系是94三分钟 94三十秒 ？？？三十秒 72一分半 35个循环 72七分钟 四度保存 重新设计的全长引物，之前二聚体都少，现在能看到二聚体，之前也看到过很多条带，现在条带跑不出来了，只能出来二聚体 @biostar2009 发自小木虫Android客户端 |
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渊博震天: 金币+5, 鼓励回帖交流 2019-04-10 08:27:20
渊博震天: 金币+5, 鼓励回帖交流 2019-04-10 08:27:20
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一般来说跑梯度用mix跑的，模板用菌液、质粒、基因组DNA都可以，浓度要求不高，但确定温度后就用Extaq、pfu，尤其是pfu对模板的浓度要求很高，浓度高于20ng/ul就扩不出来了。不知你是不是遇到这种情况 发自小木虫Android客户端 |
8楼2019-04-09 22:41:11
