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penglu28

新虫 (小有名气)


[交流] 跑PCR的时候点孔很亮,但是跑不出目的基因,请问是什么原因。

我主要做老鼠尾DNA提取,跑了好几天PCR,都跑不出带来,我以为是引物有问题,我用了一个旧的曾经跑出过带的DNA样本,以及3个新提取的DNA样本跑PCR,结果旧DNA样本跑出了条带,新DNA样本没跑出目的条带,就是点样孔很亮。我又推测可能是新样本的DNA提取质量不好,我又重新取了老鼠耳朵提取DNA,重新跑PCR,这一次旧样本DNA和新样本DNA都跑不出条带,而且旧样本的点样孔也不亮,什么都没有,但新样本的点样孔很亮。有的同学说可能DNA结合了蛋白,建议我加loading buffer之后在98度加热一下再跑胶,我也尝试了,也还是跑不出带。我之前一直用的Terra试剂盒,还用过phusion和Q5试剂盒,都跑不出带,没辙了。请教是什么原因?
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snhajn

新虫 (著名写手)



penglu28(金币+1): 谢谢参与
可能是DNA不纯,换个试剂盒试试,只是推测哈,不一定准确

发自小木虫Android客户端
3楼2020-05-04 08:41:47
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小小小青虫

新虫 (小有名气)



penglu28(金币+1): 谢谢参与
DNA有杂质,胶孔发亮,直接CTAB法+纯化试剂盒
8楼2020-05-06 09:17:25
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简单回复
2020-05-04 00:26   回复  
penglu28(金币+1): 谢谢参与
tzynew4楼
2020-05-05 16:39   回复  
penglu28(金币+1): 谢谢参与
2020-05-05 18:35   回复  
penglu28(金币+1): 谢谢参与
nono20096楼
2020-05-06 08:52   回复  
penglu28(金币+1): 谢谢参与
`
2020-05-06 09:03   回复  
penglu28(金币+1): 谢谢参与
2020-05-06 10:14   回复  
penglu28(金币+1): 谢谢参与
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