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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 跑PCR的时候点孔很亮，但是跑不出目的基因，请问是什么原因。
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penglu28

新虫 (小有名气)

[交流] 跑PCR的时候点孔很亮，但是跑不出目的基因，请问是什么原因。

我主要做老鼠尾DNA提取，跑了好几天PCR，都跑不出带来，我以为是引物有问题，我用了一个旧的曾经跑出过带的DNA样本，以及3个新提取的DNA样本跑PCR，结果旧DNA样本跑出了条带，新DNA样本没跑出目的条带，就是点样孔很亮。我又推测可能是新样本的DNA提取质量不好，我又重新取了老鼠耳朵提取DNA，重新跑PCR，这一次旧样本DNA和新样本DNA都跑不出条带，而且旧样本的点样孔也不亮，什么都没有，但新样本的点样孔很亮。有的同学说可能DNA结合了蛋白，建议我加loading buffer之后在98度加热一下再跑胶，我也尝试了，也还是跑不出带。我之前一直用的Terra试剂盒，还用过phusion和Q5试剂盒，都跑不出带，没辙了。请教是什么原因？
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1楼 2020-05-03 23:35:32
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小小小青虫

新虫 (小有名气)
★
penglu28(金币+1): 谢谢参与
DNA有杂质，胶孔发亮，直接CTAB法+纯化试剂盒
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8楼2020-05-06 09:17:25
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snhajn

新虫 (著名写手)
★
penglu28(金币+1): 谢谢参与
可能是DNA不纯，换个试剂盒试试，只是推测哈，不一定准确

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3楼2020-05-04 08:41:47
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shawxz20129楼
2020-05-06 10:14   回复  
penglu28(金币+1): 谢谢参与
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