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跑PCR的时候点孔很亮,但是跑不出目的基因,请问是什么原因。
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penglu28
新虫
(小有名气)
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(幼儿园)
金币: 229
帖子: 53
在线: 9.2小时
虫号: 15617151
[交流]
跑PCR的时候点孔很亮,但是跑不出目的基因,请问是什么原因。
我主要做老鼠尾DNA提取,跑了好几天PCR,都跑不出带来,我以为是引物有问题,我用了一个旧的曾经跑出过带的DNA样本,以及3个新提取的DNA样本跑PCR,结果旧DNA样本跑出了条带,新DNA样本没跑出目的条带,就是点样孔很亮。我又推测可能是新样本的DNA提取质量不好,我又重新取了老鼠耳朵提取DNA,重新跑PCR,这一次旧样本DNA和新样本DNA都跑不出条带,而且旧样本的点样孔也不亮,什么都没有,但新样本的点样孔很亮。有的同学说可能DNA结合了蛋白,建议我加loading buffer之后在98度加热一下再跑胶,我也尝试了,也还是跑不出带。我之前一直用的Terra试剂盒,还用过phusion和Q5试剂盒,都跑不出带,没辙了。请教是什么原因?
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1楼
2020-05-03 23:35:32
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小小小青虫
新虫
(小有名气)
应助: 1
(幼儿园)
金币: 298.2
帖子: 58
在线: 117.1小时
虫号: 15717564
★
penglu28(金币+1): 谢谢参与
DNA有杂质,胶孔发亮,直接CTAB法+纯化试剂盒
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8楼
2020-05-06 09:17:25
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snhajn
新虫
(著名写手)
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(幼儿园)
金币: 2292.3
帖子: 1730
在线: 132小时
虫号: 3013614
★
penglu28(金币+1): 谢谢参与
可能是DNA不纯,换个试剂盒试试,只是推测哈,不一定准确
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3楼
2020-05-04 08:41:47
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shawxz2012
9楼
2020-05-06 10:14
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penglu28(金币+1): 谢谢参与
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