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[交流]
老生常谈的问题，PCR没有条带。。。
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| 这次PCR的目的是扩增一段DNA序列然后插入到质粒里，导入细胞做同源重组的用途。引物是前面带了很长一段限制酶切位点的序列的（应该是用于连接时用吧），模板DNA就是普通的基因组DNA。现在的问题是，用普通的taq酶（premix）能跑出来条带，但是因为扩增的可能不保真，而且末端加了T，所以没办法用来连接。因此选择了高保真酶+dNTP+buffer的组合，但是就是扩增不出来。酶是七八月份买的，买来之后一直就放在-20没有动过。两种酶用的PCR程序是完全一样的，但是体系是按照各自的说明书来配的。现在是初步怀疑酶有问题，但是毕竟是新拆开的。。。又觉得新的应该不会出问题吧。想问问各位前辈，还有那些方面的问题？谢谢～ |
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tzynew2楼
2022-01-07 20:24
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扣扣里(金币+1): 谢谢参与
o 发自小木虫Android客户端
2022-01-07 21:55
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扣扣里(金币+1): 谢谢参与
nono20094楼
2022-01-08 00:18
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。 发自小木虫Android客户端
2022-01-10 20:28
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2022-01-10 21:54
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