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求助，只有CDS序列，如何设计引物扩增全长基因？已有4人参与
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用来构建载体的，导师只给了CDS的序列，放在DNAman里设计出的引物扩增出的都不是全长可咋整？ 不是全长没法用吧。。。 直接用这个基因两端的序列设计引物行吗？ 必须要知道基因两端外的序列吗？ 怎么才能弄到两端的序列？ 新人求罩。。。 |
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2楼2016-02-20 20:12:45
3楼2016-02-20 21:22:26
jackyoung
新虫 (正式写手)
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西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2016-02-21 22:30:38
西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2016-02-21 22:30:38
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CDS是编码序列，如果确定给的是全长编码序列，括增出来构建载体（如果是为了表达蛋白的话）是没有问题的。 如果不是说一定要带编码区以外的序列（比如研究内含子保留或UTR的调控功能），没有必要得到全长mRNA/cDNA序列。 如果一定要得到，建议先查询数据库找信息，实在不行再RACE。其实直接从文库中筛选也是个不错的方法。 发自小木虫Android客户端 |
5楼2016-02-21 00:06:05