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邸羿

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 8.5
帖子: 5
在线: 4.5小时
虫号: 2361265
注册: 2013-03-19
专业: 细胞生物学研究中的新方法

[求助] 求助细胞冻存与复苏~ 已有2人参与

请教各位大神两个问题：
1.细胞冻存时一般是把常温下的细胞放入冻存盒再放入-80，我是新手，那天先把细胞4度放了10分钟，又把细胞放到-20半个小时，再放入常温下的冻存盒最后放入-80过夜，请问我这画蛇添足的操作会对细胞产生影响吗？影响大吗？（哭）
2.我有一株细胞很少，只有5cm皿的20~30%，请问复苏时不离心可以吗？或者怎么避免损失？谢谢！！

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1楼 2016-02-05 11:35:39

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王雪源

木虫 (初入文坛)

随遇而安

应助: 1 (幼儿园)
金币: 1844.2
帖子: 19
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虫号: 3661175
注册: 2015-01-24
性别: GG
专业: 药剂学

冻存盒里加的是异丙醇，能达到冻存细胞降温速度要求，一般你把细胞直接放常温冻存盒再放-80过夜就可以了。从-20把细胞拿出来放到常温冻存盒，细胞本来结有冰晶，你再放到常温，等冻存盒温度降下来之前细胞就温度又上来了。对细胞肯定有影响。如果是贴壁细胞，细胞少的话可以直接铺，多加培养基把DMSO稀释，等到细胞贴壁可以平缓的换液，注意这时候细胞贴壁不牢，动作要轻。我这么做过，问题不大，不知道你的细胞品种可以不可以。

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