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求助细胞冻存与复苏~ 已有2人参与
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请教各位大神两个问题： 1.细胞冻存时一般是把常温下的细胞放入冻存盒再放入-80，我是新手，那天先把细胞4度放了10分钟，又把细胞放到-20半个小时，再放入常温下的冻存盒最后放入-80过夜，请问我这画蛇添足的操作会对细胞产生影响吗？影响大吗？（哭） 2.我有一株细胞很少，只有5cm皿的20~30%，请问复苏时不离心可以吗？或者怎么避免损失？谢谢！！ |
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jyifan
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2楼2016-02-05 16:22:21
jyifan
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3楼2016-02-05 16:24:37
4楼2016-02-06 01:51:45
5楼2016-02-06 03:13:09
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冻存盒里加的是异丙醇，能达到冻存细胞降温速度要求，一般你把细胞直接放常温冻存盒再放-80过夜就可以了。从-20把细胞拿出来放到常温冻存盒，细胞本来结有冰晶，你再放到常温，等冻存盒温度降下来之前细胞就温度又上来了。对细胞肯定有影响。如果是贴壁细胞，细胞少的话可以直接铺，多加培养基把DMSO稀释，等到细胞贴壁可以平缓的换液，注意这时候细胞贴壁不牢，动作要轻。我这么做过，问题不大，不知道你的细胞品种可以不可以。 发自小木虫Android客户端 |
6楼2016-02-06 10:40:12
7楼2016-02-06 11:19:20
8楼2016-02-06 11:22:30
【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
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我也不用冻存盒冻过，4度半小时，-20度1-2小时，这时候冻存管里应该冰了，再放到-80，也可以用棉花包着放，过夜后放液氮。也没事。 发自小木虫Android客户端 |
9楼2016-02-06 11:34:13
【答案】应助回帖
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邸羿: 金币+7, ★有帮助 2016-02-06 11:52:45
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你那样的结果我也不好说，得看你复苏能不能复出来，不要把细胞直接扔-80 发自小木虫Android客户端 |
10楼2016-02-06 11:35:39
200