应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 求助细胞冻存与复苏~
121/2返回列表12下一页
查看: 2161  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

邸羿

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助细胞冻存与复苏~ 已有2人参与

请教各位大神两个问题：
1.细胞冻存时一般是把常温下的细胞放入冻存盒再放入-80，我是新手，那天先把细胞4度放了10分钟，又把细胞放到-20半个小时，再放入常温下的冻存盒最后放入-80过夜，请问我这画蛇添足的操作会对细胞产生影响吗？影响大吗？（哭）
2.我有一株细胞很少，只有5cm皿的20~30%，请问复苏时不离心可以吗？或者怎么避免损失？谢谢！！
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2016-02-05 11:35:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jyifan

木虫 (小有名气)
有一定影响，具体多大要自己评估

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
勤勉、坚持
2楼2016-02-05 16:22:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jyifan

木虫 (小有名气)
复苏离心不离心，看品种吧，我做过10多个，没发现有影响的

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
勤勉、坚持
3楼2016-02-05 16:24:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (著名写手)
感谢参与，应助指数 +1
本帖仅楼主可见
赞一下
4楼2016-02-06 01:51:45
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

匿名

用户注销 (著名写手)
本帖仅楼主可见
赞一下
5楼2016-02-06 03:13:09
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

王雪源

木虫 (初入文坛)

随遇而安
冻存盒里加的是异丙醇，能达到冻存细胞降温速度要求，一般你把细胞直接放常温冻存盒再放-80过夜就可以了。从-20把细胞拿出来放到常温冻存盒，细胞本来结有冰晶，你再放到常温，等冻存盒温度降下来之前细胞就温度又上来了。对细胞肯定有影响。如果是贴壁细胞，细胞少的话可以直接铺，多加培养基把DMSO稀释，等到细胞贴壁可以平缓的换液，注意这时候细胞贴壁不牢，动作要轻。我这么做过，问题不大，不知道你的细胞品种可以不可以。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
随遇而安
6楼2016-02-06 10:40:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

邸羿

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by pf790352975 at 2016-02-06 03:13:09
不好意思 应该是DMSO    刚才写错了抱歉哈

请问我那样冻存影响大吗？比起直接扔到-80呢？
赞一下 回复此楼
7楼2016-02-06 11:19:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

邸羿

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 王雪源 at 2016-02-06 10:40:12
冻存盒里加的是异丙醇，能达到冻存细胞降温速度要求，一般你把细胞直接放常温冻存盒再放-80过夜就可以了。从-20把细胞拿出来放到常温冻存盒，细胞本来结有冰晶，你再放到常温，等冻存盒温度降下来之前细胞就温度又上 ...

请问我那样冻存影响大吗？比起直接扔到-80呢？
赞一下 回复此楼
8楼2016-02-06 11:22:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王雪源

木虫 (初入文坛)

随遇而安

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
8楼: Originally posted by 邸羿 at 2016-02-06 11:22:30
请问我那样冻存影响大吗？比起直接扔到-80呢？...

我也不用冻存盒冻过，4度半小时，-20度1-2小时，这时候冻存管里应该冰了，再放到-80，也可以用棉花包着放，过夜后放液氮。也没事。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
随遇而安
9楼2016-02-06 11:34:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王雪源

木虫 (初入文坛)

随遇而安

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
邸羿: 金币+7, ★有帮助 2016-02-06 11:52:45
引用回帖:
9楼: Originally posted by 王雪源 at 2016-02-06 11:34:13
我也不用冻存盒冻过，4度半小时，-20度1-2小时，这时候冻存管里应该冰了，再放到-80，也可以用棉花包着放，过夜后放液氮。也没事。
...

你那样的结果我也不好说，得看你复苏能不能复出来，不要把细胞直接扔-80

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
随遇而安
10楼2016-02-06 11:35:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 邸羿 的主题更新
121/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料专硕 335 分求调剂 +4 拒绝冷暴力 2026-03-25 4/200 2026-03-25 18:45 by haxia
[考研] 考研一志愿苏州大学初始315（英一）求调剂 +3 sbdksD 2026-03-24 4/200 2026-03-25 18:16 by xcjcqu
[考研] 086000生物与医药292求调剂 +3 小小陈小小 2026-03-22 5/250 2026-03-25 16:29 by 求调剂zz
[考研] 334分 一志愿武理-080500 材料求调剂 +3 李李不服输 2026-03-25 3/150 2026-03-25 13:38 by cocolv
[考研] 347求调剂 +4 L when 2026-03-25 4/200 2026-03-25 13:37 by cocolv
[考研] 299求调剂 +7 shxchem 2026-03-20 9/450 2026-03-25 10:41 by lbsjt
[考研] 085601求调剂总分293英一数二 +3 钢铁大炮 2026-03-24 3/150 2026-03-24 22:03 by bingxueer79
[考研] 277分求调剂，跨调材料 +3 考研调剂lxh 2026-03-24 3/150 2026-03-24 13:52 by JourneyLucky
[考研] 环境学硕288求调剂 +8 皮皮皮123456 2026-03-22 8/400 2026-03-23 23:47 by 热情沙漠
[考研] 269求调剂 +4 我想读研11 2026-03-23 4/200 2026-03-23 21:25 by pswait
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境，总分308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-23 8/400 2026-03-23 20:36 by Creta
[考研] 化学308分求调剂 +3 你好明天你好 2026-03-23 3/150 2026-03-23 20:11 by macy2011
[考研] 280分求调剂 一志愿085802 +4 PUMPT 2026-03-22 7/350 2026-03-22 22:13 by 星空星月
[考研] 求调剂一志愿海大，0703化学学硕304分，有大创项目，四级已过 +6 幸运哩哩 2026-03-22 10/500 2026-03-22 20:10 by edmund7
[考研] 275求调剂 +6 shansx 2026-03-22 8/400 2026-03-22 15:27 by barlinike
[考研] 材料求调剂 +5 @taotao 2026-03-21 5/250 2026-03-21 20:55 by lbsjt
[考研] 0703化学调剂 +4 妮妮ninicgb 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:39 by 学员8dgXkO
[考研] 中南大学化学学硕337求调剂 +3 niko- 2026-03-19 6/300 2026-03-20 21:58 by luoyongfeng
[考研] A区线材料学调剂 +5 周周无极 2026-03-20 5/250 2026-03-20 21:33 by laoshidan
[考研] 本科郑州大学物理学院，一志愿华科070200学硕，346求调剂 +4 我不是一根葱 2026-03-18 4/200 2026-03-19 09:11 by 浮云166
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭