| 查看: 2487 | 回复: 11 | ||
[求助]
求助细胞冻存与复苏~ 已有2人参与
|
|
请教各位大神两个问题： 1.细胞冻存时一般是把常温下的细胞放入冻存盒再放入-80，我是新手，那天先把细胞4度放了10分钟，又把细胞放到-20半个小时，再放入常温下的冻存盒最后放入-80过夜，请问我这画蛇添足的操作会对细胞产生影响吗？影响大吗？（哭） 2.我有一株细胞很少，只有5cm皿的20~30%，请问复苏时不离心可以吗？或者怎么避免损失？谢谢！！ |
回复此楼» 猜你喜欢
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有19人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有121人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
-
ALK5 高选择性小分子 LY-3200882：可放大合成路线与质控要点解析
已经有0人回复
-
AM630（CAS 164178-33-0）：CB2 选择性配体的实验使用与供应要点
已经有0人回复
-
ADC标杆分子T-DM1全解析：从结构设计到实验室应用的技术要点
已经有0人回复
-
HILIC磁珠研究蛋白组学怎么做？
已经有0人回复
-
His标签蛋白纯化怎么才能快？
已经有0人回复
jyifan
木虫 (小有名气)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 5252.7
- 红花: 1
- 帖子: 147
- 在线: 24.8小时
- 虫号: 2946815
- 注册: 2014-01-24
- 性别: GG
- 专业: 细胞生物学
2楼2016-02-05 16:22:21
jyifan
木虫 (小有名气)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 5252.7
- 红花: 1
- 帖子: 147
- 在线: 24.8小时
- 虫号: 2946815
- 注册: 2014-01-24
- 性别: GG
- 专业: 细胞生物学
3楼2016-02-05 16:24:37
4楼2016-02-06 01:51:45
5楼2016-02-06 03:13:09
|
冻存盒里加的是异丙醇，能达到冻存细胞降温速度要求，一般你把细胞直接放常温冻存盒再放-80过夜就可以了。从-20把细胞拿出来放到常温冻存盒，细胞本来结有冰晶，你再放到常温，等冻存盒温度降下来之前细胞就温度又上来了。对细胞肯定有影响。如果是贴壁细胞，细胞少的话可以直接铺，多加培养基把DMSO稀释，等到细胞贴壁可以平缓的换液，注意这时候细胞贴壁不牢，动作要轻。我这么做过，问题不大，不知道你的细胞品种可以不可以。 发自小木虫Android客户端 |
6楼2016-02-06 10:40:12
7楼2016-02-06 11:19:20
8楼2016-02-06 11:22:30
【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
|
我也不用冻存盒冻过，4度半小时，-20度1-2小时，这时候冻存管里应该冰了，再放到-80，也可以用棉花包着放，过夜后放液氮。也没事。 发自小木虫Android客户端 |
9楼2016-02-06 11:34:13
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
邸羿: 金币+7, ★有帮助 2016-02-06 11:52:45
邸羿: 金币+7, ★有帮助 2016-02-06 11:52:45
|
你那样的结果我也不好说，得看你复苏能不能复出来，不要把细胞直接扔-80 发自小木虫Android客户端 |
10楼2016-02-06 11:35:39