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雨儿天0320

铜虫 (正式写手)

[求助] 请问DNA定量过程中260/280的比值代表什么? 已有1人参与

用试剂盒提取基因组DNA后,用紫外DNA定量仪测定其中的DNA含量,但是同时操作的两个样品,DNA含量的差异相差近10倍,查看260/280的比值,发现含量低的260/280的比值在正常的1.7-1.9之间,而含量高的260/280的比值在0.45或0.46,请问哪个数据较可靠?好事基因组DNA的杂质太多?

谢谢!
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雨儿天0320

铜虫 (正式写手)

送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by lifechuteng at 2016-01-28 11:06:52
不知您那里是否有产物纯化试剂盒啊,有的话可以直接用这种盒子纯化,柱子我建议还是选择基因组抽提的柱子,这样得率会高一点。
DNA在洗脱液的环境中是比较难上柱的,所以切不可直接将回收的DNA加到柱子上去结合。...

好的,谢谢!我试试
5楼2016-01-28 13:19:03
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lifechuteng

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
雨儿天0320: 金币+5 2016-01-28 09:58:04
A280nm是蛋白和酚类物质最高吸收峰的吸收波长,比值可进行核酸样品纯度评估:纯DNA的A260/A280比值为1.8,纯RNA为2.0。如果比值低,表示受到蛋白(芳香族)或酚类物质的污染,需要纯化样品。比值=1.5相当于50%蛋白质/DNA溶液。
2楼2016-01-28 08:53:56
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雨儿天0320

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lifechuteng at 2016-01-28 08:53:56
A280nm是蛋白和酚类物质最高吸收峰的吸收波长,比值可进行核酸样品纯度评估:纯DNA的A260/A280比值为1.8,纯RNA为2.0。如果比值低,表示受到蛋白(芳香族)或酚类物质的污染,需要纯化样品。比值=1.5相当于50%蛋白 ...

谢谢,那我如果想纯化我已经得到的基因组DNA,可否用按照原来试剂盒提取方法重新纯化一下?还是直接真脆酚类或蛋白类物质纯化呢?
谢谢
3楼2016-01-28 09:59:37
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lifechuteng

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 雨儿天0320 at 2016-01-28 09:59:37
谢谢,那我如果想纯化我已经得到的基因组DNA,可否用按照原来试剂盒提取方法重新纯化一下?还是直接真脆酚类或蛋白类物质纯化呢?
谢谢...

不知您那里是否有产物纯化试剂盒啊,有的话可以直接用这种盒子纯化,柱子我建议还是选择基因组抽提的柱子,这样得率会高一点。
DNA在洗脱液的环境中是比较难上柱的,所以切不可直接将回收的DNA加到柱子上去结合。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

4楼2016-01-28 11:06:52
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