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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 请问DNA定量过程中260/280的比值代表什么？
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雨儿天0320

铜虫 (正式写手)

[求助] 请问DNA定量过程中260/280的比值代表什么？已有1人参与

用试剂盒提取基因组DNA后，用紫外DNA定量仪测定其中的DNA含量，但是同时操作的两个样品，DNA含量的差异相差近10倍，查看260/280的比值，发现含量低的260/280的比值在正常的1.7-1.9之间，而含量高的260/280的比值在0.45或0.46，请问哪个数据较可靠？好事基因组DNA的杂质太多？

谢谢！
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1楼2016-01-28 08:28:15
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lifechuteng

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
雨儿天0320: 金币+5 2016-01-28 09:58:04
A280nm是蛋白和酚类物质最高吸收峰的吸收波长，比值可进行核酸样品纯度评估：纯DNA的A260/A280比值为1.8，纯RNA为2.0。如果比值低，表示受到蛋白（芳香族）或酚类物质的污染，需要纯化样品。比值=1.5相当于50％蛋白质/DNA溶液。
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2楼2016-01-28 08:53:56
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雨儿天0320

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lifechuteng at 2016-01-28 08:53:56
A280nm是蛋白和酚类物质最高吸收峰的吸收波长，比值可进行核酸样品纯度评估：纯DNA的A260/A280比值为1.8，纯RNA为2.0。如果比值低，表示受到蛋白（芳香族）或酚类物质的污染，需要纯化样品。比值=1.5相当于50％蛋白 ...

谢谢，那我如果想纯化我已经得到的基因组DNA，可否用按照原来试剂盒提取方法重新纯化一下？还是直接真脆酚类或蛋白类物质纯化呢？
谢谢
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3楼2016-01-28 09:59:37
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lifechuteng

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 雨儿天0320 at 2016-01-28 09:59:37
谢谢，那我如果想纯化我已经得到的基因组DNA，可否用按照原来试剂盒提取方法重新纯化一下？还是直接真脆酚类或蛋白类物质纯化呢？
谢谢...

不知您那里是否有产物纯化试剂盒啊，有的话可以直接用这种盒子纯化，柱子我建议还是选择基因组抽提的柱子，这样得率会高一点。
DNA在洗脱液的环境中是比较难上柱的，所以切不可直接将回收的DNA加到柱子上去结合。
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雨儿天0320
4楼2016-01-28 11:06:52
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雨儿天0320

铜虫 (正式写手)
送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by lifechuteng at 2016-01-28 11:06:52
不知您那里是否有产物纯化试剂盒啊，有的话可以直接用这种盒子纯化，柱子我建议还是选择基因组抽提的柱子，这样得率会高一点。
DNA在洗脱液的环境中是比较难上柱的，所以切不可直接将回收的DNA加到柱子上去结合。...

好的，谢谢！我试试
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5楼2016-01-28 13:19:03
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