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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 酵母膜蛋白提取方法
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11516072

新虫 (初入文坛)

[交流] 酵母膜蛋白提取方法 已有2人参与

有没有知道酵母膜蛋白的提取方法 跪求分享，TCA丙酮法怎么样，最后一步离心结束直接取上清就可以了吗

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1楼 2016-01-20 21:39:32
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乔艳明

金虫 (小有名气)
★
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您好！我也要提酵母的膜蛋白，综合我的了解，酵母细胞壁和细胞膜交联很紧，不容易去除，得到的细胞质膜容易受到组蛋白、细胞器膜蛋白等的污染。目前，一些膜蛋白提取试剂盒大多用于植物、动物和细菌，酵母相关的试剂盒我只看到国内有。看到丁香园上的信息了解到其效果并不是很好！

因此，我也很郁闷。目前在尝试多种方法，遇到的问题我们可以一起交流。
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5楼2017-11-16 19:52:42
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swlsangon

木虫 (小有名气)

快乐的木虫
★
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TCA丙酮法可以的，不过具体操作你就要仔细了
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11516072
生命在于运动
2楼2016-01-21 09:53:18
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11516072

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by swlsangon at 2016-01-21 09:53:18
TCA丙酮法可以的，不过具体操作你就要仔细了

您有没有具体的实验步骤和注意细节，可不可以给我分享一份 不胜感激

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3楼2016-01-21 13:42:04
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swlsangon

木虫 (小有名气)

快乐的木虫
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by 11516072 at 2016-01-21 13:42:04
您有没有具体的实验步骤和注意细节，可不可以给我分享一份 不胜感激
...

三倍体积以上预冷的10%TCA-丙酮溶液进行沉淀，-20℃过夜。冷丙酮洗涤沉淀，抽干，溶于8M尿素，进行蛋白浓度测定
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生命在于运动
4楼2016-01-21 14:39:25
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