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11516072

新虫 (初入文坛)

[交流] 酵母膜蛋白提取方法 已有2人参与

有没有知道酵母膜蛋白的提取方法 跪求分享,TCA丙酮法怎么样,最后一步离心结束直接取上清就可以了吗

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swlsangon

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TCA丙酮法可以的,不过具体操作你就要仔细了

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生命在于运动
2楼2016-01-21 09:53:18
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11516072

新虫 (初入文坛)

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引用回帖:
2楼: Originally posted by swlsangon at 2016-01-21 09:53:18
TCA丙酮法可以的,不过具体操作你就要仔细了

您有没有具体的实验步骤和注意细节,可不可以给我分享一份 不胜感激

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3楼2016-01-21 13:42:04
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swlsangon

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引用回帖:
3楼: Originally posted by 11516072 at 2016-01-21 13:42:04
您有没有具体的实验步骤和注意细节,可不可以给我分享一份 不胜感激
...

三倍体积以上预冷的10%TCA-丙酮溶液进行沉淀,-20℃过夜。冷丙酮洗涤沉淀,抽干,溶于8M尿素,进行蛋白浓度测定
生命在于运动
4楼2016-01-21 14:39:25
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乔艳明

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您好!我也要提酵母的膜蛋白,综合我的了解,酵母细胞壁和细胞膜交联很紧,不容易去除,得到的细胞质膜容易受到组蛋白、细胞器膜蛋白等的污染。目前,一些膜蛋白提取试剂盒大多用于植物、动物和细菌,酵母相关的试剂盒我只看到国内有。看到丁香园上的信息了解到其效果并不是很好!

因此,我也很郁闷。目前在尝试多种方法,遇到的问题我们可以一起交流。
5楼2017-11-16 19:52:42
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