应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 怎样用PCR法克隆一个新基因？
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
121/2返回列表12下一页
查看: 1569  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

963831239

银虫 (小有名气)

[求助] 怎样用PCR法克隆一个新基因？ 已有4人参与

采用PCR法从植物基因组中克隆出基因，求具体方法与步骤
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
HCD崇
1楼 2016-01-20 21:38:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

子禾纳言

新虫 (初入文坛)
比对出比较保守序列，设计引物

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2016-01-20 22:08:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pengc201

禁虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
963831239: 金币+10, ★有帮助 2016-01-21 11:01:21
本帖内容被屏蔽
6楼2016-01-21 00:40:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

守望海贝

捐助贵宾 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
963831239: 金币+10, ★★★很有帮助 2016-01-22 22:28:28
同源性比对后在保守区设计引物，然后送去上海生工合成引物。引物合成完，以阳性DNA模板进行PCR扩增，扩增完若有目的条带，可以酶切后连到载体上送去测序公司测序，也可以直接将PCR产物（最好将PCR产物切胶纯化后）送去测序。
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2016-01-22 12:08:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sail000000

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
963831239: 金币+10, ★★★很有帮助 2016-01-22 22:28:40
最好用相近种属的序列比对，同源性比对后在保守区设计引物，然后PCR测序，比对是否一样
保守区域如果在ORF两端就可以直接拿到编码区，如果只是中间的一个片段，想要拿到全长，就需要做3'或者5' RACE了
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2016-01-22 14:54:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

exon2002

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
新基因！如果真是一个新基因，以前一无所知，暂时不能用PCR方法扩增。PCR的前提是要知道（或推断）其短序列！！
赞一下(1人) 回复此楼
10楼2016-01-23 05:46:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

963831239

银虫 (小有名气)
就是新基因通过近亲物种同源比对查找到了，接下来怎么用PCR法克隆出来？
赞一下 回复此楼
HCD崇
2楼2016-01-20 21:58:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

子禾纳言

新虫 (初入文坛)
NCBI查找

发自小木虫Android客户端
回复此楼
3楼2016-01-20 22:02:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

963831239

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 子禾纳言 at 2016-01-20 22:02:41
NCBI查找

假设已经查找到了，之后怎么操作就不清楚了
赞一下 回复此楼
HCD崇
4楼2016-01-20 22:06:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

963831239

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 子禾纳言 at 2016-01-20 22:02:41
NCBI查找

谢谢
回复此楼
HCD崇
7楼2016-01-21 15:33:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 963831239 的主题更新
121/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 290求调剂085701 +7 1314捧花 2026-04-02 7/350 2026-04-04 23:33 by lqwchd
[考研] 化学357分，考研调剂 +8 .Starry. 2026-04-04 9/450 2026-04-04 22:52 by 理想在实践之中
[考研] 298求调剂 +5 zzz，，r 2026-04-02 8/400 2026-04-04 19:55 by 蓝云思雨
[考研] 387求调剂 +4 爱吃片豆土 2026-04-03 5/250 2026-04-04 08:10 by 岸上的一条鱼
[考研] 317分 一志愿江南大学 化学工程学硕 求调剂 +6 YinTai 2026-04-03 6/300 2026-04-03 22:30 by 无际的草原
[考研] 求调剂 +3 wos666 2026-04-03 3/150 2026-04-03 21:36 by lbsjt
[考研] 343求调剂085601 +6 要努力学习x 2026-03-29 7/350 2026-04-03 19:49 by 百灵童888
[考研] 329求调剂，一志愿西北工业大学，材料工程（085601） +8 小小机灵虫 2026-03-29 14/700 2026-04-03 19:38 by lijunpoly
[考研] 372分材料与化工（085600）一志愿湖南大学求调剂 +3 蓝笺片 2026-04-03 4/200 2026-04-03 17:58 by Jimmyandyou
[考研] 一志愿华中农业071010，总分320求调剂 +7 困困困困坤坤 2026-04-02 7/350 2026-04-03 17:26 by Yuena_Wang
[考研] 085600 295分求调剂 +19 W55j 2026-03-30 23/1150 2026-04-03 09:53 by 千千运气
[考研] 08开头看过来！！！ +4 wwwwffffff 2026-03-31 6/300 2026-04-02 11:42 by 均值回归
[考研] 材料专硕322分 +11 哈哈哈吼吼吼哈 2026-04-01 11/550 2026-04-02 10:52 by lnilvy
[考研] 求调剂，一志愿 南京航空航天大学 ，080500材料科学与工程学硕，总分289分 +11 @taotao 2026-03-29 11/550 2026-04-02 10:04 by realme321
[考研] 0710生物学，325求调剂 +3 mkkkkkl 2026-04-01 3/150 2026-04-02 09:48 by Jaylen.
[考研] 296求调剂 +4 汪！？！ 2026-03-31 7/350 2026-04-01 22:04 by 客尔美德
[考研] 考研生物与医药调剂 +7 铁憨憨123425 2026-03-31 7/350 2026-04-01 08:45 by JourneyLucky
[考研] 英一数一总分334求调剂 +4 陈阳坤 2026-03-31 4/200 2026-03-31 14:22 by 记事本2026
[考研] 296求调剂 +10 彼岸t 2026-03-29 10/500 2026-03-30 10:50 by 探123
[考研] 一志愿双一流机械285分求调剂 +4 幸运的三木 2026-03-29 5/250 2026-03-29 14:49 by Miko19
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭