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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 引物的长度为10bp
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真果粒

新虫 (初入文坛)

[求助] 引物的长度为10bp 已有2人参与

想从1300bp的片段上P  880bp左右的目的片段，于是就设计了一对长度为10bp左右的引物。计算出的TM值只有13℃左右，但pcr仪能设定的最低退火温度是30℃。于是只能用30--40℃进行温度梯度进行PCR，但结果如下（左边六条带）。有没有人用过这么短的引物进行过PCR呢？或者我这想法根本就行不通？求大神指教。。

引物的长度为10bp
IMG_20160118_164201.jpg
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徘徊在街头，不知何去何从。
1楼 2016-01-18 17:31:49
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xhp_1638

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-01-18 22:58:10
引物Tm值要在50~65℃。
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发展才是硬道理！
2楼2016-01-18 21:12:04
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2012continue

新虫 (小有名气)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-01-18 22:58:25
1、梯度范围设大点，30度---56度，
2、重新设计引物，就算有错配也不所谓的，只要不太离谱。
赞一下 回复此楼
3楼2016-01-18 21:28:00
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原海亮

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你用什么软件设计引物额，没提示你这个引物的可行性么

发自小木虫Android客户端
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天空才是极限，我有信心飞的更高！
4楼2016-01-19 07:33:51
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