应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 蛋白质纯化问题
333/4返回列表上一页1234下一页
查看: 3099  |  回复: 32
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

MarchZR

银虫 (小有名气)
引用回帖:
19楼: Originally posted by 湖南戴鹏辉 at 2016-01-27 16:31:02
好的，谢谢大神...

低温诱导15度也可以尝试
赞一下 回复此楼
21楼2016-01-28 11:39:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

掌控恶魔

新虫 (小有名气)
一般和破碎的条件没有关系，理论上可能影响而已，主要还是和你基因设计的问题，你可以重新设计。也可以尝试重新摸索表达的条件，时间、诱导剂加入点，温度等等方面进行着手就可以免去之前的基因设计了。
不过你的目的蛋白已经表达了，看你对于蛋白的要求，并不是说包涵体的蛋白不能用，我们每年都纯化百来个的包涵体蛋白。也没啥影响，你现在可以最好了解一下你用包涵体做的话有没有问题
赞一下 回复此楼
22楼2016-02-03 10:30:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hc2015

新虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
nono2009: 金币-20, 应助指数-1, 屏蔽内容, 违规存档, 注册商家也只能在广告区发广告，其它区发广告仍属违规 2016-05-05 22:14:13
本帖内容被屏蔽
23楼2016-02-15 11:36:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

francstone

金虫 (小有名气)
这是包涵体，就是蛋白没有正确折叠，造成聚集后沉淀。改进方法：首选是改变buffer的条件，其次是换表达体系，比如酵母或者昆虫细胞，293细胞；最后就是分析序列，改变表达蛋白的长度

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
24楼2016-02-15 20:32:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

francstone

金虫 (小有名气)
忘了说，包涵体变复性也是个选择

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
25楼2016-02-15 20:33:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

湖南戴鹏辉

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
20楼: Originally posted by MarchZR at 2016-01-28 11:39:30
遇到包涵体的情况最先考虑的不是你破碎的哪些条件等，那都是次要的，不足以导致包涵体的形成。你现在有两条路可以选择：要不就继续纯化包涵体，最后复性得到蛋白。要不就重新的设计基因合成新的质粒，再次表达然后纯 ...

谢谢
回复此楼
好好生活，好好工作
26楼2016-03-11 20:18:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

麦子果树

新虫 (小有名气)
想请教一下，这个照片是用什么照的
赞一下 回复此楼
27楼2016-04-28 14:51:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chengo12c

新虫 (初入文坛)
包涵体，建议18℃诱导过夜，看看表达情况，如果还不行的话，就像上面的几位所言，8M尿素变性，再纯化，复性。至少这样获得的蛋白可以用于PULL DOWN

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
28楼2016-04-28 15:59:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chengo12c

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
27楼: Originally posted by 麦子果树 at 2016-04-28 14:51:40
想请教一下，这个照片是用什么照的

我觉得应该是用扫描仪扫的

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
29楼2016-04-28 15:59:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chengo12c

新虫 (初入文坛)
对了，有个BL21

发自小木虫Android客户端
回复此楼
30楼2016-04-28 16:00:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 湖南戴鹏辉 的主题更新
333/4返回列表上一页1234下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 8/400 2026-11-06 05:44 by qL1cU46YIdK0
[基金申请] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 11/550 2026-11-06 05:43 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 8/400 2026-11-06 05:33 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 10/500 2026-11-06 05:32 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 8/400 2026-11-06 05:22 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 9/450 2026-11-06 05:21 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +7 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 11/550 2026-11-06 05:15 by Equinoxhua
[考研] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 14/700 2026-11-06 05:11 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 kvewwGtKktqB 2026-11-04 11/550 2026-11-06 05:10 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +5 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 14/700 2026-11-06 04:58 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +7 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 19/950 2026-11-06 04:38 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 4/200 2026-11-06 02:37 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 7/350 2026-11-06 02:13 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 10/500 2026-11-06 02:04 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 9/450 2026-11-06 02:02 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 hNpp4Y2CGvSC 2026-11-04 12/600 2026-11-06 01:53 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +6 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 10/500 2026-11-06 01:51 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +5 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 10/500 2026-11-06 01:40 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +5 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 11/550 2026-11-06 01:20 by qL1cU46YIdK0
[基金申请] 各位基础老师们，看完中央《从严治党》的决定后，对学术界更加有信心了吧 +5 iaeyuan 2026-11-01 5/250 2026-11-04 14:43 by jinchengzi
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭