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tgifi新虫 (小有名气)
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求解pcr模板2.7k，P两端或中间一部分可以出来，p全长时候只能出来800bp.怎么解救 已有3人参与
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如题，求大神帮忙(≧▽≦) 发自小木虫Android客户端 |
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tedaluobo
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重新设计引物，扩增比目的片段大一些，引物设计位置在promoter和终止子后，克隆成功后，再用你之前设计的引物扩，就能得到目的序列了。 楼主扩过中间片段，可以尝试目的序列分成几段，然后设计一个特殊的引物，用overlap PCR试试 发自小木虫Android客户端 |
2楼2016-01-15 13:08:34
tgifi
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3楼2016-01-15 15:51:06
4楼2016-01-15 15:53:03
5楼2016-01-15 15:56:56
6楼2016-01-15 18:53:26
7楼2016-01-16 17:18:40
jackyoung
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两端和中间括增出来的确定对吗？已知序列还是怎么？建议如下: 1.通过各种数据库多收集信息，包括优化克隆策略（尤其是引物设计） 2.实验需要重复，比如重新制备模板，优化PCR条件（稀释后续PCR模板，增加overlap步骤的梯度设置等） 发自小木虫Android客户端 |
8楼2016-01-18 09:01:38
tgifi
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9楼2016-01-18 23:02:11
tgifi
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10楼2016-01-18 23:03:17
40