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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 求解pcr模板2.7k，P两端或中间一部分可以出来，p全长时候只能出来800bp.怎么解救
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tgifi

新虫 (小有名气)

[求助] 求解pcr模板2.7k，P两端或中间一部分可以出来，p全长时候只能出来800bp.怎么解救 已有3人参与

如题，求大神帮忙(≧▽≦)

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1楼 2016-01-15 12:47:47
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3306549

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
检查序列，重新设计引物
2700bp延伸至少3min吧
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6楼2016-01-15 18:53:26
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tedaluobo

金虫 (小有名气)
重新设计引物，扩增比目的片段大一些，引物设计位置在promoter和终止子后，克隆成功后，再用你之前设计的引物扩，就能得到目的序列了。
楼主扩过中间片段，可以尝试目的序列分成几段，然后设计一个特殊的引物，用overlap PCR试试

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追云沐雨
2楼2016-01-15 13:08:34
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tgifi

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by tedaluobo at 2016-01-15 13:08:34
重新设计引物，扩增比目的片段大一些，引物设计位置在promoter和终止子后，克隆成功后，再用你之前设计的引物扩，就能得到目的序列了。
楼主扩过中间片段，可以尝试目的序列分成几段，然后设计一个特殊的引物，用ov ...

这个就是overpcr来的，再用它做模板就有杂带了

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3楼2016-01-15 15:51:06
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梦想天行

木虫 (职业作家)
楼主你好

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4楼2016-01-15 15:53:03
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