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俊锋

新虫 (初入文坛)

[求助] 是个小白,求助关于pcr,跑电泳,没p出条带,点样孔会亮。已有4人参与

做5‘RACE   PCR
提取植物的RNA后,用Smart试剂盒反转录出cDNA,以cDNA为模板,做pcr,没p出条带,点样孔会亮,做了两次pcr,两次都出现这种情况
第一次做pcr的时候用了两个模板,退火温度是70与64,点样孔没亮;温度是60与55,点样孔会亮的。
第二次做pcr,希释一个模板,做温度梯度pcr,温度设在63  61.4  58.9  56  53.5  51.9  51度,63度点样孔没亮,其他的都亮了,没p出条带。
其他师姐他们用同一个pcr仪可以p出条带。
现在做这个实验换了几次试剂盒,再做下去老师的钱都被我用光了。
求个位大神帮帮忙忙

是个小白,求助关于pcr,跑电泳,没p出条带,点样孔会亮。
第二次pcr电泳图
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Ciruela

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
是不是胶浓度太大了啊,减少浓度试试看
12楼2016-01-12 16:58:08
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