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中大

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于HPLC流动相调pH的问题 已有1人参与

我需要配制25mmol /L HP_β_CD , 15 %乙醇 , 0. 5 %三乙胺, pH为3. 5 的流动相。调pH用的是醋酸,那么这个pH是在应该在定容前调好还是定容后调好?
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袁自遵

金虫 (小有名气)

2楼2016-01-07 07:48:28
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药师1206

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
应该定溶后调,调好再稀释,pH就变化了。

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3楼2016-01-07 08:02:53
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中大

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 药师1206 at 2016-01-07 08:02:53
应该定溶后调,调好再稀释,pH就变化了。

已经配过一次定容后再调的,一开始以为醋酸不用加很多,结果在调pH过程中加了不少醋酸(pH计测pH,边测边加醋酸),导致HP-β-CD浓度降低了(做手性拆分,这个浓度要求较严格,是重要条件)。若果定容前调好的话,考虑到醋酸是弱酸,稀释后电离平衡移动,担心定容后pH会有变化。像这种请况,各位是怎么处理的?或者如果是你来配这个流动相,你会怎么配呢?
4楼2016-01-07 08:52:22
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中大

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 袁自遵 at 2016-01-07 07:48:28
定容前调好

定容前调好的话,定容后pH会变化吧?我配流动相是用醋酸调的pH,稀释后醋酸电离平衡改变,pH会变化吧?这种情况下应该怎么配呢? HP-β-CD浓度、乙醇、三乙胺百分比都要按要求配。
5楼2016-01-07 08:58:03
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药师1206

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

看你方法怎么规定,一般调pH用的乙酸不会加很大体积,对溶液总体积的影响可以忽略不计。

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6楼2016-01-07 09:16:23
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中大

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 药师1206 at 2016-01-07 09:16:23
看你方法怎么规定,一般调pH用的乙酸不会加很大体积,对溶液总体积的影响可以忽略不计。

我做的流动相要求pH=3.5,配了一次,越接近3.5,pH值就越难降低了(酸性条件下乙酸更难电离,这个好理解),确确实实加了不少,定容后500mL的溶液调pH加了大概有30mL冰醋酸导致HP-β-CD浓度、乙醇等的配比都变化了。
7楼2016-01-07 10:26:51
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