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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 关于HPLC流动相调pH的问题
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中大

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于HPLC流动相调pH的问题 已有1人参与

我需要配制25mmol /L HP_β_CD , 15 %乙醇 , 0. 5 %三乙胺, pH为3. 5 的流动相。调pH用的是醋酸，那么这个pH是在应该在定容前调好还是定容后调好？
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1楼 2016-01-06 23:04:09
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袁自遵

金虫 (小有名气)
定容前调好

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2楼2016-01-07 07:48:28
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药师1206

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
应该定溶后调，调好再稀释，pH就变化了。

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3楼2016-01-07 08:02:53
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中大

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 药师1206 at 2016-01-07 08:02:53
应该定溶后调，调好再稀释，pH就变化了。

已经配过一次定容后再调的，一开始以为醋酸不用加很多，结果在调pH过程中加了不少醋酸（pH计测pH，边测边加醋酸），导致HP-β-CD浓度降低了(做手性拆分，这个浓度要求较严格，是重要条件）。若果定容前调好的话，考虑到醋酸是弱酸，稀释后电离平衡移动，担心定容后pH会有变化。像这种请况，各位是怎么处理的？或者如果是你来配这个流动相，你会怎么配呢?
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4楼2016-01-07 08:52:22
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中大

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 袁自遵 at 2016-01-07 07:48:28
定容前调好

定容前调好的话，定容后pH会变化吧？我配流动相是用醋酸调的pH,稀释后醋酸电离平衡改变，pH会变化吧？这种情况下应该怎么配呢？ HP-β-CD浓度、乙醇、三乙胺百分比都要按要求配。
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5楼2016-01-07 08:58:03
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药师1206

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

看你方法怎么规定，一般调pH用的乙酸不会加很大体积，对溶液总体积的影响可以忽略不计。

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6楼2016-01-07 09:16:23
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中大

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 药师1206 at 2016-01-07 09:16:23
看你方法怎么规定，一般调pH用的乙酸不会加很大体积，对溶液总体积的影响可以忽略不计。

我做的流动相要求pH=3.5，配了一次，越接近3.5，pH值就越难降低了（酸性条件下乙酸更难电离，这个好理解），确确实实加了不少，定容后500mL的溶液调pH加了大概有30mL冰醋酸导致HP-β-CD浓度、乙醇等的配比都变化了。
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7楼2016-01-07 10:26:51
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