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HPLC 出峰时间随着时间的进行也向后推移问题，请教大家！！！
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关于流动相配制问题 各位大侠好。 本人现在在用HPLC-ECD检测6-OHDA，流动相是：25mM柠檬酸，125mM磷酸钠（文献中写的是sodium phosphate），100mg/lEDTA，30mg/lSOS，配置好后用磷酸调节pH至2.5（我们实际操作中，比2.5高）. 现有问题如下： 1.关于pH:我第一次检测的时候，调节pH至3.5，但是出峰时间随着时间的进行也向后推移了，而且是每进一针都向后退0.1-0.2分钟，推测可能是由于pH变化导致的，于是3天后又测那瓶流动相的pH为3.8，又过了三天再测变为4.2.可是我第二次测时候，当天做完实验测得pH值和我第二天早上测得pH值几乎没有变化！于是我又迷茫了！莫名奇妙。于是又找其他原因。 2.我用sodium phosphate，瓶子上写的是这个，但是化学式是磷酸二氢钠。但是就缓冲对来说，是不是没有太大影响？另外在配置流动相的时候有没有什么注意事项？比如操作有没有什么规定？（我是先放柠檬酸，再放磷酸二氢钠，然后让EDTA，最后放SOS，倒入蒸馏水定容至1升，然后调节pH,不知道是不是操作有问题？） 多谢 |
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2楼2011-05-27 16:29:35