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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 突变质粒构建pcr问题
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vivianvj

新虫 (小有名气)

[求助] 突变质粒构建pcr问题 已有2人参与

请问，我在构建突变质粒时pcr时，为何会出现两条带呢，我用的是PGL-3basic，目的片段左边的应该是1400+，右边的应该是1600+

突变质粒构建pcr问题
引物莫条件2016-01-06 13hr 28min.jpg
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1楼 2016-01-06 14:36:04
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carl_taijun

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
1楼: Originally posted by vivianvj at 2016-01-06 14:36:04
请问，我在构建突变质粒时pcr时，为何会出现两条带呢，我用的是PGL-3basic，目的片段左边的应该是1400+，右边的应该是1600+

引物莫条件2016-01-06 13hr 28min.jpg...

确定引物单一位点结合的吗？

发自小木虫IOS客户端
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3楼2016-01-06 17:14:49
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a13515517892

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
建议你说明具体的情况，图上最亮的是marker吗？还有就是构建质粒使用的什么方法来做的，这样我给你解释，不然不知道是怎么做的，说多了反而影响你实验
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2楼2016-01-06 15:59:59
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vivianvj

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by a13515517892 at 2016-01-06 15:59:59
建议你说明具体的情况，图上最亮的是marker吗？还有就是构建质粒使用的什么方法来做的，这样我给你解释，不然不知道是怎么做的，说多了反而影响你实验

是这样，中间最亮的是MARKER，两边分别是两个突变质粒，左边的是1400+，右边的是1600+，这个图是PCR产物图，出现多条带，不知道后续如何处理比较好，谢谢
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4楼2016-01-06 18:07:10
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vivianvj

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by carl_taijun at 2016-01-06 17:14:49
确定引物单一位点结合的吗？
...

不确定，有错配
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5楼2016-01-06 18:07:26
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